目的:研究piRNAs在男性患者精浆中的差异表达;构建动物模型,初步探讨piRNAs在精子发生过程中的作用.方法:收集患者的精浆样本进行测序,获得差异表达的piRNAs,利用RT-qPCR检测piRNAs在不同类型精子症中的相对表达量,探讨piRNAs对男性不育的诊断意义.另外,在小鼠模型中,通过组织病理学、RNA-protein pull-down及Western印迹等实验,初步探讨piRNAs在精子发生过程中的作用机制.结果:通过RT-qPCR对245例男性患者精浆样品进行检测,发现hsa_piR_000478在畸形精子症中高表达,且通过绘制ROC曲线,发现hsa_piR_000478对畸形精子症的诊断具有辅助意义(AUC=0.754 9);小鼠模型中将hsa_piR_000478及其同源序列piR_mmu_54800729转染进小鼠生精小管,发现实验组小鼠精子活力降低、畸形率升高,且睾丸结构破坏;进一步通过分子生物学实验,发现piRNAs与能量代谢相关通路相关,其通过提升细胞糖酵解水平,干扰精子正常发生.结论:hsa_piR_000478对男性不育的诊断具有一定的辅助意义;在睾丸生精微环境中,piRNAs可能通过影响糖酵解相关通路,干扰精子发生.
作者：高志翔；王华沛；段能亮；冉元帅；崔凤梅；陈秋；薛波新；刘晓龙
来源：中华男科学杂志 2023 年 29卷 3期
