目的 利用特异性siRNA沉默YAP1基因表达,探讨YAP1的表达对体外胰腺癌细胞增殖、凋亡和侵袭作用的影响.方法 利用脂质体转染法将含有YAP1特异性siRNA的真核表达质粒稳定转染至人胰腺癌PANC-1细胞株;实时定量PCR和Western blot法检测PANC-1细胞中YAP1基因的表达情况;CCK-8法、流式细胞及Transwells侵袭实验分别检测调控YAP1的表达对体外胰腺癌细胞增殖、凋亡和侵袭作用的影响.结果 我们成功建立YAP1 siRNA稳定转染的胰腺癌PANC-1细胞株.经实时定量PCR和Western blot证实siRNA组较空载体组胰腺癌细胞YAP1 mRNA转录和蛋白表达水平明显降低.CCK-8检测发现siRNA组较空载体组胰腺癌细胞增殖能力显著下降(P<0.05);流式细胞检测提示siRNA组较空载体组胰腺癌细胞凋亡率明显增加(P<0.05);Transwells侵袭实验显示siRNA组的穿膜胰腺癌细胞数显著多于空载体组(P<0.05). 结论 特异性siRNA沉默YAP1基因表达能显著抑制胰腺癌细胞的增殖和促进凋亡,同时明显抑制胰腺癌细胞的体外侵袭能力.
作者:朱世凯;周玉;汪旭东;刘兴超;陈凯;陈云飞;赵冀;张宇;邓小凡
来源:中华普通外科杂志 2014 年 29卷 9期