目的：探讨高糖对原代肾小球足细胞表达 MST1的影响。方法采用健康 SD 大鼠取肾组织，经过梯度离心后获取细胞悬液，培养原代肾小球足细胞，分别采用流式细胞术、免疫荧光染色验证原代细胞性质；将原代足细胞分为正常培养组（5 mmol／L）及高糖培养组（25 mmol／L）分别培养，以培养后12、24、48、72 h 为观察时间点。采用间接免疫荧光染色及 Western 印迹检测 caspase-3及MST1的表达。多组比较采用单因素方差分析，组间比较采用 q 检验。结果（1）采用健康 SD 大鼠培养可以获得稳定的原代细胞，间接免疫荧光染色显示细胞稳定表达 Nephrin、Wilms 肿瘤基因1（WT1），流式细胞计数检测显示93．18％的原代细胞稳定表达 Nephrin 蛋白。（2）免疫荧光染色显示正常培养组足细胞可见少量 MST1表达，主要位于细胞浆；高糖培养组，MST1表达有所增强，48 h 时开始出现较多细胞核表达。（3）Western 印迹检测结果显示，正常培养组足细胞可见低浓度的Caspase-3及 MST1表达，高糖培养组 Caspase-3及 MST1表达上调，差异有统计学意义（F ＝84．989、312．407，P ＜0．001）；高糖培养组48 h时 MST1可见亚带表达（MST1裂解片段），随造模时间延长表达增加。结论MST1信号通路异常可能参与糖尿病肾病的发生。
作者：薛玲；吴蔚桦；欧三桃；刘琦；张帆；李莹
来源：中华肾病研究电子杂志 2014 年 4期
