目的:通过建立胶质瘤细胞与巨噬细胞的融合细胞模型，探究胶质瘤－巨噬融合细胞的巨噬细胞极化特征及其对胶质瘤细胞增殖、侵袭能力的影响。方法:应用小鼠来源的胶质瘤细胞GL261和巨噬细胞RAW264.7构建并筛选GL261xRAW264.7融合细胞。分别培养GL261、RAW264.7、GL261xRAW264.7融合细胞，收集细胞上清获得相应的条件培养基(CM，即GL261-CM、RAW264.7-CM、GL261xRAW264.7-CM)。采用流式细胞术检测GL261xRAW264.7融合细胞的染色体含量及其与RAW264.7细胞的巨噬细胞标志物CD86、CD206的表达量；通过CCK-8、Transwell或划痕实验评估GL261xRAW264.7融合细胞与亲代细胞(即GL261、RAW264.7细胞)增殖、迁移能力的差异，以及GL261xRAW264.7-CM与亲代细胞CM培养的GL261细胞增殖、迁移、侵袭能力的差异；通过免疫磁珠－流式细胞术检测RAW264.7与RAW264.7xGL261融合细胞分泌巨噬细胞M1型细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和IL-23及M2型细胞因子IL-10、转化生长因子β1(TGF-β)的差异。结果:成功构建了GL261xRAW264.7融合细胞，且经流式细胞术证实GL261xRAW264.7融合细胞的染色体含量明显增加(G 1和G 2/M峰均较亲代细胞右移)。CCK-8增殖实验结果显示，GL261xRAW264.7融合细胞的

作者：胡跃东；王佩文；张梦梦；周贤喆；刘福生；米蕊芳

来源：中华神经外科杂志 2024 年 40卷 5期