目的 探讨脑胶质瘤组织中微小RNA(miR)-433、组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)的表达水平及miRNA-433对脑胶质瘤细胞增殖、侵袭的影响和作用机制.方法 (1)收集新乡医学院第一附属医院神经外科自2010年1月至2014年12月手术切除并经病理检查证实的脑胶质瘤标本42例(低级别14例,高低级别28例),另外选取同期因颅脑外伤手术切除的正常脑组织标本13例.采用RT-PCR检测脑胶质瘤组织和正常脑组织miRNA-433、HDAC6 mRNA的表达.(2)体外常规培养脑胶质瘤U251细胞,分为空白对照组、无义序列对照组和miRNA-433模拟物组,后2组分别转染无义序列和miRNA-433模拟物,空白对照组不做处理.RT-PCR检测细胞miRNA-433和HDA C6、P21 mRNA的表达.CCK-8法检测培养1～5 d时的细胞存活率.流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率.Transwell实验检测细胞的侵袭能力.Western blotting检测细胞HDAC6蛋白的表达.(3)构建野生型(WT)HDAC63'-UTR、突变型(MUT)HDAC63'-UTR荧光报告载体.将miR-433模拟物+WT HDAC63'-UTR、无义序列+WT HDAC63'-UTR分别转染U251细胞,双荧光素酶实验检测2组细胞的荧光强度.将miR-433模拟物+MUT HDAC63'-UTR、无义序列+MUT HDAC63'-UTR分别转染U251细胞,双荧光素酶实验检测2组细胞的荧光强度.(4)将U251细胞分为无义序列对照组、HDAC

作者：李祥生；马彦娟；惠磊；刘瑞华；赵树鹏；金保哲

来源：中华神经医学杂志 2017 年 16卷 12期