白藜芦醇在烧伤血清诱导的肺微血管内皮细胞凋亡中的作用研究-临床诊疗知识库

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作者：肖厚安；周小茜；张丽；安鸿肇；刘晨；王煜；寇谦；邓旭东；贾赤宇

来源：中华损伤与修复杂志（电子版） 2015 年 10卷 4期

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白藜芦醇在烧伤血清诱导的肺微血管内皮细胞凋亡中的作用研究

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作者：

肖厚安；周小茜；张丽；安鸿肇；刘晨；王煜；寇谦；邓旭东；贾赤宇

来源：

中华损伤与修复杂志（电子版） 2015 年 10卷 4期

标签：

烧伤内皮细胞细胞凋亡 Burns Pulmonary microvascular endothelial cells Cell apoptosis

目的探讨白藜芦醇在烧伤血清诱导的肺微血管内皮细胞(PMVEC)凋亡中的作用及可能的分子机制.方法 (1)取5只SD大鼠背部于95℃热水浴18 s制成30％总体表面积Ⅲ度烫伤模型,伤后24 h制备烧伤大鼠血清;另取5只SD大鼠不做处理,制备正常大鼠血清.(2)体外组织块法培养大鼠PMVEC,免疫组织化学法鉴定细胞.取第3代对数生长期的细胞分别接种6孔板和12孔板,各板均分为3组(每组设3个复孔):对照组、烧伤血清组、烧伤血清±白藜芦醇组.白藜芦醇在烧伤血清刺激前2h加入(浓度20 μmol/L).(3)采用铺明胶的Transwell培养细胞后,酶联免疫吸咐法检测单层细胞通透性;采用吖啶橙-溴化乙啶法检测PMVEC的凋亡;RT-PCR检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及白细胞介素-1β(IL-1β)的mRNA水平;Western blot法检测细胞沉默信息调节因子1(SIRT1)以及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)的表达.结果 (1)原代培养细胞生长较慢,呈铺路石样生长;传代后细胞呈均匀分布生长.细胞凝血因子Ⅷ阳性表达率为(97±3)％,鉴定为PMVEC.(2)培养24h后,对照组,烧伤血清组,烧伤血清±白藜芦醇组中细胞通透性分别为(87±16)、(220±11)、(131 ±11) ng/mL(F=207.40,P＜0.05),细胞凋亡率分别为(5.2±2.3)％、(22.3±3.7)％、(11.7±2.3)％(F=69.07,P＜0.05).

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