目的 探讨树突状表皮T淋巴细胞(DETC)在小鼠皮肤移植免疫排斥反应中的作用及其相关机制. 方法 (1)取1只野生型C57B L/6雄性小鼠背部全层皮肤,分离表皮细胞,流式细胞仪检测DETC表达情况及细胞表型.另取1只野生型C57BL/6雄性小鼠背部全层皮肤,分离表皮,免疫荧光技术观察DETC形态学特征.(2)分别取4只绿色荧光蛋白(GFP)标记C57BL/6雄性小鼠、7只野生型C57BL/6雌性小鼠(野生型组)以及7只γδT淋巴细胞δ基因敲除C57B L/6雌性小鼠(基因敲除组).剪去野生型组与基因敲除组小鼠背部1.4 cm×1.4 cm大小全层皮肤,移植GFP标记C57BL/6雄性小鼠背部1.2 cm×1.2 cm大小全层皮肤,通过小动物活体成像仪及肉眼观察,判定并记录移植皮片存活时间.(3)取2只野生型C57B L/6雄性小鼠,分离表皮细胞,加入48孔板,按随机数字表法分为激活组和对照组,每组4孔.激活组加入2 μg/mL刀豆蛋白A 10 μL,对照组加入等量PBS,处理24 h后用流式细胞仪检测DETC表达γ干扰素情况.(4)取4只GFP标记C57BL/6雄性小鼠(供体);取14只野生型C57 BL/6雌性小鼠(受体),按随机数字表法分为γ干扰素中和组和对照组,每组7只.按(2)中方法构建皮肤移植模型,术前和术后72 h,γ干扰素中和组小鼠腹腔注射1 mg/mLγ干扰素中和抗体200 μL,对照组注射等量生理盐水,同(2)
作者：黄华；燕荣帅；刘美希；周俊峄；谭江琳；张晓容；胡晓红；黄勇；贺伟峰
来源：中华烧伤杂志 2015 年 31卷 2期
