目的:探讨甲基转移酶METTL3和LncRNA Pvt-1在周围神经损伤后雪旺细胞增殖和迁移中的作用。方法:体内实验qRT-PCR实验检测周围神经损伤后Pvt-1及METTL3的表达变化,meRIP-seq检测Pvt-1的6-甲基腺嘌呤(m6A)表达变化。体外实验对雪旺细胞分别转染过表达METTL3的质粒和空质粒,并依此将转染后的雪旺细胞分为对照组和METTL3过表达组。EDU染色、CCK8计数及Transwell实验分析METTL3和Pvt-1在雪旺细胞增殖和迁移中的生物学作用。结果:与正常周围神经组织相比,损伤后的远端神经组织中Pvt-1与METTL3的表达水平均明显升高(
P<0.05),Pvt-1的m6A修饰水平也明显升高(
P<0.05),且损伤后不同时间(0、3、7、14 d)的表达水平及甲基化修饰水平的变化趋势一致。在体外实验中,METTL3过表达组细胞中的Pvt-1的表达水平较对照组明显升高(
P<0.05),同时Pvt-1的m6A修饰水平也明显升高(
P<0.05)。EDU染色和CCK8结果显示,METTL3过表达组和对照组相比,雪旺细胞的增殖能力明显增强(
P<0.05)。Transwell结果显示与对照组相比,METTL3过表达组周围神经损伤后的雪旺细胞穿模数量明显增加(
P<0.05)。
结论:METTL3可能通过增强Pvt-1的m6A甲基化修饰,上调Pvt-1的表达进而促进雪旺细胞的增殖
作者:马胜;李渠蓬;余会林;高啸;冯虎;潘彬
来源:中华手外科杂志 2023 年 39卷 2期