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目的 分泌表达风疹病毒E1-374糖蛋白并检测其免疫原性.方法 将E1-374蛋白的cDNA插入表达载体pGAPZαA中构建出表达质粒pGAPZαA-E1-374,经BlnⅠ酶线性化后通过电转的方法导入毕赤酵母菌,博来霉素筛选阳性菌落.间接免疫荧光和Western Blot检测E1-374蛋白的表达及免疫反应性.免疫小鼠后应用间接ELISA检测风疹病毒IgG抗体.结果 SDS-PAGE和Western Blot显示E1-374蛋白的相对分子质量为46.89×103.ELISA法检测免疫小鼠的抗血清为阳性.建立的间接ELISA方法的最佳工作条件是抗原包被浓度为5.5μg/ml,血清最佳稀释度为1:100,板内变异系数值为0.36％～12.45％.结论 E1-374蛋白能够引起小鼠体液免疫应答,是风疹亚单位疫苗的重要候选成分,并可应用于风疹病毒IgG抗体的检测.
作者：李振梅；温红玲；林彬；孙成玺；褚福禄；袁晓晶；宋艳艳；许洪芝；王志玉
来源：中华实验和临床病毒学杂志 2013 年 27卷 4期
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