目的 构建富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白2( LRIG2)基因全长及胞外段的慢病毒表达载体并转染人胶质瘤细胞株,观察其对胶质瘤细胞增殖的影响.方法 运用基因重组技术将LRIG2基因全长(LRIG2)和胞外段(LRIG2ecto)片段分别插入慢病毒载体pLVX-Puro-3×Flag；然后用pLVX-Puro-3×Flag-LRIG2和pLVX-Puro-3×Flag-LRIG2ecto分别转染胶质瘤细胞株U87；荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot分别检测LRIG2及LRIG2ecto的mRNA和蛋白表达；细胞增殖检测试剂盒( CCK-8)检测转染后细胞的增殖；流式细胞术检测细胞周期.结果 Western blot鉴定Flag标签蛋白表达成功；LRIG2及LRIG2ecto过表达组mRNA表达分别是对照组的8.42和29.58倍(P＜0.01)；LRIG2及LRIG2ecto过表达组细胞增殖率明显高于对照组；LRIG2及LRIG2ecto过表达组细胞增殖指数(PI)分别为(50.63±1.29)％和(48.61±0.55)％,明显高于对照组(45.48±0.72)％ (P＜0.01).结论 成功建立稳定表达外源性LRIG2基因全长及胞外段的人胶质瘤细胞株,且证实均促进胶质瘤细胞增殖.
作者：肖群根；谢蕊繁；杨洪宽；王宝峰；郭东生；雷霆
来源：中华实验外科杂志 2012 年 29卷 9期
