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目的 观察Ⅱ型大麻素受体(CB2)选择性抑制剂AM630对钛颗粒(Ti)诱导炎性破骨细胞(OC)活化的影响.方法 实验分5组,即空白组、核因子-κB (NF-κB)受体活化因子配体(RANKL)组、Ti组、R+Ti组、药物组.采用噻唑蓝(MTT)法检测0.1 g/LTi颗粒和不同浓度AM630(50、100、200 nmol/L)处理小鼠单核/巨噬细胞株RAW264.7后24、48、72 h细胞增殖活性;以0.1 g/L Ti颗粒和(或)50 μg/L RANKL诱导RAW264.7,6d时加入AM630再培养24h,以抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测成熟OC,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CB2、NF-κB受体活化因子(RANK)、肌酸磷酸激酶(CPK)基因mRNA含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎性因子白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α表达水平.结果 MTT结果表明0.1 g/L Ti颗粒和(或)AM630(50、100、200 nmol/L)对RAW264.7细胞增殖能力无影响.TRAP染色,RANKL组、R+Ti颗粒组均可见大量的紫红色多核细胞;Ti组、药物组阳性细胞较少,统计分析结果表明AM630≥100 nmol/L时,TRAP阳性细胞数量与RANKL组[(181.80±14.23)/孔]比较差异有统计学意义(p<0.05).定量RT-PCR结果显示R+Ti组CB2、RANK以及CPK mRNA含量分别为11.26±1.39、9.68±0.91和9.93±0.56;药物组(100 nmol/L AM630)上述基因mRNA含量为4.73±0

作者:耿德春;徐耀增;杨惠林;朱雪松;毛海青;王骏骅;孟斌;陈亮

来源:中华实验外科杂志 2013 年 30卷 1期

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作者:
耿德春;徐耀增;杨惠林;朱雪松;毛海青;王骏骅;孟斌;陈亮
来源:
中华实验外科杂志 2013 年 30卷 1期
标签:
破骨细胞 炎症 钛颗粒 大麻素受体2 Osteoclasts Inflammation Titanium particles Cannabinoid receptor 2
目的 观察Ⅱ型大麻素受体(CB2)选择性抑制剂AM630对钛颗粒(Ti)诱导炎性破骨细胞(OC)活化的影响.方法 实验分5组,即空白组、核因子-κB (NF-κB)受体活化因子配体(RANKL)组、Ti组、R+Ti组、药物组.采用噻唑蓝(MTT)法检测0.1 g/LTi颗粒和不同浓度AM630(50、100、200 nmol/L)处理小鼠单核/巨噬细胞株RAW264.7后24、48、72 h细胞增殖活性;以0.1 g/L Ti颗粒和(或)50 μg/L RANKL诱导RAW264.7,6d时加入AM630再培养24h,以抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测成熟OC,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CB2、NF-κB受体活化因子(RANK)、肌酸磷酸激酶(CPK)基因mRNA含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎性因子白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α表达水平.结果 MTT结果表明0.1 g/L Ti颗粒和(或)AM630(50、100、200 nmol/L)对RAW264.7细胞增殖能力无影响.TRAP染色,RANKL组、R+Ti颗粒组均可见大量的紫红色多核细胞;Ti组、药物组阳性细胞较少,统计分析结果表明AM630≥100 nmol/L时,TRAP阳性细胞数量与RANKL组[(181.80±14.23)/孔]比较差异有统计学意义(p<0.05).定量RT-PCR结果显示R+Ti组CB2、RANK以及CPK mRNA含量分别为11.26±1.39、9.68±0.91和9.93±0.56;药物组(100 nmol/L AM630)上述基因mRNA含量为4.73±0

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