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目的 探讨缩短型脾酪氨酸激酶[SYK(S)]对人肝癌细胞侵袭转移的影响及其分子机制.方法 采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot方法检测7株人肝癌细胞株和人永生化肝细胞L02中SYK(S)的表达;分别构建SYK(S)过表达的稳定细胞株SMMC7721-SYK(S)和MHCC-97H-SYK(S);Transwell侵袭小室检测稳定细胞株中SYK(S)对肝癌细胞侵袭能力的影响.裸鼠肝脏原位移植瘤模型检测SYK(S)表达对肿瘤肺转移的影响,每组裸小鼠6只;干扰SYK(S)表达后,Western blot检测肝癌细胞中上皮细胞-间充质转化(EMT)主要标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的变化,以及免疫组织化学方法检测裸鼠皮下移植瘤中SYK(S)对E-cadherin和Vimentin蛋白表达的影响.结果 在具有较高转移潜能的肝癌细胞株MHCC-97H和MHCC-97L中,SYK(S)相对高表达;SYK(S)可增强肝癌细胞穿透Transwell小室基底膜的能力(P<0.05).体内实验表明,SYK(S)可促进原位肝移植瘤的肺转移(P<0.05);在小鼠皮下移植瘤中,SYK(S)导致E-cadherin蛋白表达降低,而增加Vimentin蛋白表达水平.相反,干扰SYK(S)表达后,肝癌细胞中E-cadherin蛋白表达升高,伴Vimentin蛋白表达降低.结论 SYK(S)可通过EMT促进肝癌的侵袭转移.

作者:洪健;唐云强;廖亚帝;王莉;何璐;元云飞

来源:中华实验外科杂志 2013 年 30卷 6期

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作者:
洪健;唐云强;廖亚帝;王莉;何璐;元云飞
来源:
中华实验外科杂志 2013 年 30卷 6期
标签:
癌,肝细胞 脾酪氨酸激酶 侵袭转移 上皮间质转化 Carcinoma,hepatocellular Spleen tyrosine kinase Invasion and metastasis Epithelial-mesenchymal transition
目的 探讨缩短型脾酪氨酸激酶[SYK(S)]对人肝癌细胞侵袭转移的影响及其分子机制.方法 采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot方法检测7株人肝癌细胞株和人永生化肝细胞L02中SYK(S)的表达;分别构建SYK(S)过表达的稳定细胞株SMMC7721-SYK(S)和MHCC-97H-SYK(S);Transwell侵袭小室检测稳定细胞株中SYK(S)对肝癌细胞侵袭能力的影响.裸鼠肝脏原位移植瘤模型检测SYK(S)表达对肿瘤肺转移的影响,每组裸小鼠6只;干扰SYK(S)表达后,Western blot检测肝癌细胞中上皮细胞-间充质转化(EMT)主要标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的变化,以及免疫组织化学方法检测裸鼠皮下移植瘤中SYK(S)对E-cadherin和Vimentin蛋白表达的影响.结果 在具有较高转移潜能的肝癌细胞株MHCC-97H和MHCC-97L中,SYK(S)相对高表达;SYK(S)可增强肝癌细胞穿透Transwell小室基底膜的能力(P<0.05).体内实验表明,SYK(S)可促进原位肝移植瘤的肺转移(P<0.05);在小鼠皮下移植瘤中,SYK(S)导致E-cadherin蛋白表达降低,而增加Vimentin蛋白表达水平.相反,干扰SYK(S)表达后,肝癌细胞中E-cadherin蛋白表达升高,伴Vimentin蛋白表达降低.结论 SYK(S)可通过EMT促进肝癌的侵袭转移.

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