目的 将重组人降钙素基因相关肽α(hCGRPα)逆转录病毒载体(pLNCX2-hCGRPα)感染人骨髓间充质干细胞(hBMSCs),观察其对hBMSCs增殖与成骨活性的影响.方法 采用Ficoll淋巴细胞分离液梯度离心法获得自体原代hBMSCs并传代保存.将重组逆转录病毒pLNCX2-hCGRPα感染第2代hBMSCs.细胞分3组:(1)实验组:pLNCX2-hCGRPα感染hBMSCs.(2)空载体组:空载体pLNCX2感染hBMSCs；(3)正常对照组:正常培养hBMSCs,不给予特殊处理.实验7d采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测细胞内hCGRPα基因mRNA与蛋白表达,1 ～7d采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,14 d检测细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性值与培养液骨钙素含量,7d检测细胞层粘连蛋白(LN).结果 实验组细胞中表达hCGRPα mRNA,而空载体组和正常对照组细胞不表达.与空载体组和正常对照组比较,实验组细胞表现出较高增殖率(P＜0.05).实验组细胞ALP活性值、LN、培养液骨钙素含量分别为(119.33±11.95) U/100 mg蛋白、(12.11±1.56) μg/L、(1.123 ±0.115) μg/L,均高于空载体组[(66.16±6.82) U/100 mg蛋白、(7.32±0.98)μg/L、(0.602 ±0.097) μg/L和正常对照组[(67.73±7.31) U/100 mg蛋白、(6.46±1.41) μg/L、(0.498±0.109) μg/L],差异均有统计学意义(P＜0.0

作者：王义生；王宸；王亚寒；孙俊魁；李劲峰；赵国强；李月白

来源：中华实验外科杂志 2013 年 30卷 11期