目的 观察人胃癌组织中分离培养的间充质干细胞(hGC-MSCs)对胃癌细胞株SGC-7901增殖与侵袭能力的影响.方法 提取hGC-MSCs条件培养液(MSC-CM),用不同浓度(20%、40%、60%)的MSC-CM作用于SGC-7901细胞,噻唑蓝(MTT)法及Transwell侵袭实验检测各组细胞增殖与侵袭能力;实时聚合酶链反应(Real-time PCR)、Western blot和细胞免疫化学法检测增殖细胞核抗原(PCNA)和基质金属蛋白酶(MMP)-9在各组细胞中的表达.结果 MTT法证实MSC-CM对SGC-7901细胞增殖有抑制作用(P<0.05),抑制率与MSC-CM的浓度和作用时间呈正比.Transwell侵袭实验表明,经MSC-CM处理后,对照组及20%、40%、60% MSC-CM组穿膜细胞数分别为(75.71±7.32)、(63.68 ±7.12)、(54.29 ±6.97)和(41.36±3.29)个,随MSC-CM浓度升高,细胞侵袭能力明显下降(P<0.05).Real-time PCR结果证实MSC-CM能明显下调PCNA和MMP-9的表达(P<0.01).Western blot检测20%、40%、60% MSC-CM组PCNA表达分别为对照组的(73.99 ±16.71)%、(51.56±12.18)%和(40.11±9.37)%,MMP-9表达分别为对照组的(74.35±19.12)%、(53.59 ±10.41)%和(29.58±7.93)%,细胞免疫化学结果显示PCNA在对照组、20%、40%、60% MSC-CM组中的平均吸光度值分别为0.201 ±0.049、0.185 ±0.
作者:王凯;李玉明;张明凯;姜吉祥;苏庆亮
来源:中华实验外科杂志 2014 年 31卷 3期