目的 微小RNA-363(miR-363)对人血管平滑肌细胞(VSMCs)的增殖及迁移的调控,并探讨其影响VSMCs生物学行为的机制.方法 30 μg/L血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导原代培养的人VSMCs表型转化,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测miR-363含量变化.miR-363模拟物及阴性对照(miR-NC)转染VSMCs,细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell法分别检测细胞增殖、迁移,Western blot法检测表型标志蛋白的表达.生物信息学方法分析miR-363靶基因,Western blot法检测.结果 PDGF-BB刺激72 h后VSMCs向合成型表型改变,表型标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达下调28％ (P＜0.05),碱性调宁蛋白(Calponin-1)无显著改变,miR-363的表达量下调70％ (P＜0.01).与miR-NC组比较,在72 h,过表达miR-363组VSMCs增殖抑制32％ (P ＜0.05),迁移抑制30％(P＜0.05);且miR-363的靶基因Kruppel样因子4(KLF4)蛋白表达在转染24、48、72 h后分别降低19％ (P ＜0.05)、52％ (P＜0.01)和37％ (P＜0.01),而其表型标志蛋白α-SMA、Calponin-1表达无明显变化.结论 miR-363可抑制人VSMCs的增殖和迁移,其作用可能是通过靶向KLF4来实现的.
作者：苏成锴；黄英；李维敏；陆信武；黄新天；陆民；蒋米尔
来源：中华实验外科杂志 2014 年 31卷 4期
