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目的 探讨在结肠癌肝转移肿瘤微环境中肝再生磷酸酶-3(PRL-3)对调控结肠癌LoVo细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及其机制.方法 将稳定表达PRL-3的LoVo细胞(LoVo-P)、对照组(LoVo-C)与人正常肝细胞(L02)模拟肿瘤微环境进行体外共培养0、24、48、72 h,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结肠癌细胞VEGF表达水平;并加入核因子-κB(NF-κB)抑制剂BAY 11-7082(10μmoL/L)后检测VEGF表达及其培养基上清对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)管腔形成能力的影响.结果RT-PCR结果显示,共培养后LoVo-P组VEGF在mRNA水平表达明显升高(P<0.01),LoVo-C组变化不明显;ELISA检测结果显示,LoVo-P组VEGF蛋白升高值为(779±160)ng/L,LoVo-C组为(173±88)ng/L,差异有统计学意义(P<0.01).Western blot检测结果显示,LoVo-P组共培养24、48、72 h VEGF表达分别升高1.9、2.2、3.5倍;共培养后LoVo-P细胞IκB激酶(IKK)磷酸化水平明显增加,加入NF-κB抑制剂BAY1l-7082后,IKK磷酸化水平降低,VEGF表达降低(P<0.01).HUVEC管腔形成实验显示,共培养后培养基上清能增加HUVEC的成环性,加入NF-κB抑制剂BAY11-7082后,HUVEC的成环性减弱(P<0.05).结论 在与肝细胞共培养的体外模拟肿瘤微环境中,PRL-3能够激活

作者:吴哲;黄永亮;徐凯;林渊;曾育杰;蓝球生;褚忠华

来源:中华实验外科杂志 2016 年 33卷 8期

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作者:
吴哲;黄永亮;徐凯;林渊;曾育杰;蓝球生;褚忠华
来源:
中华实验外科杂志 2016 年 33卷 8期
标签:
结肠癌 肝再生磷酸酶-3 肝细胞 血管内皮生长因子 Colon cancer Phosphatase of regenerating liver-3 Hepatic cell Vascular endothelial growth factor
目的 探讨在结肠癌肝转移肿瘤微环境中肝再生磷酸酶-3(PRL-3)对调控结肠癌LoVo细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及其机制.方法 将稳定表达PRL-3的LoVo细胞(LoVo-P)、对照组(LoVo-C)与人正常肝细胞(L02)模拟肿瘤微环境进行体外共培养0、24、48、72 h,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结肠癌细胞VEGF表达水平;并加入核因子-κB(NF-κB)抑制剂BAY 11-7082(10μmoL/L)后检测VEGF表达及其培养基上清对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)管腔形成能力的影响.结果RT-PCR结果显示,共培养后LoVo-P组VEGF在mRNA水平表达明显升高(P<0.01),LoVo-C组变化不明显;ELISA检测结果显示,LoVo-P组VEGF蛋白升高值为(779±160)ng/L,LoVo-C组为(173±88)ng/L,差异有统计学意义(P<0.01).Western blot检测结果显示,LoVo-P组共培养24、48、72 h VEGF表达分别升高1.9、2.2、3.5倍;共培养后LoVo-P细胞IκB激酶(IKK)磷酸化水平明显增加,加入NF-κB抑制剂BAY1l-7082后,IKK磷酸化水平降低,VEGF表达降低(P<0.01).HUVEC管腔形成实验显示,共培养后培养基上清能增加HUVEC的成环性,加入NF-κB抑制剂BAY11-7082后,HUVEC的成环性减弱(P<0.05).结论 在与肝细胞共培养的体外模拟肿瘤微环境中,PRL-3能够激活

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