目的 观察小于扰RNA(siRNAs)沉默DNA甲基转移酶(DNMTs)上调N-myc下游调节基因1(NDRG1)表达对前列腺癌DU145细胞生物学行为的影响.方法 使用siRNAs分别抑制DU145细胞中DNMT1、DNMT3b及DNMT1+ DNMT3b的表达;使用Western blot、实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中DNMT1、DNMT3b及NDRG1的表达改变;通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、Muse凋亡检测仪、划痕实验和Transwell侵袭实验,检测细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的改变;筛选上述改变最显著组DU145细胞,抑制细胞中NDRG1表达,再次检测上述细胞生物学行为.结果 Western blot及RT-qPCR结果显示,与对照组比较,DNMT1抑制组、DNMT3b抑制组及联合抑制组的NDRG1 mRNA(1.59±0.03,1.23±0.01,1.36±0.11比0.90±0.15,1.00±0.03)和蛋白(1.07 ±0.16,0.49 ±0.01,0.92±0.09比0.23 ±0.04,0.30±0.07)表达显著增加(P<0.05).CCK-8结果显示,在24、48、72 h,DNMT1抑制组吸光度(A)值为0.189±0.030、0.266±0.048、0.419±0.058:DNMT3b抑制组为0.221±0.023、0.318 ±0.072、0.498±0.064;联合抑制组为0.199±0.021、0.284±0.062、0.488±0.091,与对照组比较,显著减少(P<0.05).凋亡检测结果显示,DNMT1抑制组凋亡率为(22.40±1.36)%、DNMT3b抑制组为(14.20±0.
作者:李亚林;李丽;张一然;潘盼;刘冉录
来源:中华实验外科杂志 2016 年 33卷 12期