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目的 观察二氢青蒿素(DHA)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)联合用药抑制膀胱癌T24细胞增殖并探讨其机制.方法 采用不同浓度(0、12.5、25.0、50.0、100.0μmol/L)的DHA及加入自噬抑制剂3-MA(5 mmol/L)分别处理膀胱癌T24细胞24、48、72 h后,通过噻唑蓝(MTT)实验分析细胞存活率,流式细胞术测定细胞凋亡,Western blot检测凋亡标记蛋白半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3酶原(procaspase-3)、多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(t-PARP)和多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶降解产物(cleaved-PARP)的表达水平.50.0 tμmol/L DHA作用于膀胱癌T24细胞24 h后,丹酰戊二胺(MDC)染色后采用荧光显微镜对自噬进行形态观察,透射电子显微镜观察白噬体超微结构,Western blot检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1和p62的表达.结果 DHA抑制膀胱癌T24细胞的增殖并诱导其凋亡,作用呈浓度和时间依赖性(12.5 μmol/L的DHA 24、48、72 h抑制率依次是5.79%、6.61%、11.09%;25.0 μmol/L的DHA 24、48、72 h抑制率依次是11.25%、15.32%、21.35%;50.0 μmol/L的DHA 24、48、72 h抑制率依次是27.16%、30.66%、47.58%;100.0μmol/L的DHA 24、48、72 h抑制率依次是41.52%、57.52%、74.29%;12.5 μmol/L的DHA 24、48、72 h死亡率依

作者:王凯旋;李法平;郭辉;刘树坤;刘二鹏;侯宇川

来源:中华实验外科杂志 2017 年 34卷 12期

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作者:
王凯旋;李法平;郭辉;刘树坤;刘二鹏;侯宇川
来源:
中华实验外科杂志 2017 年 34卷 12期
标签:
膀胱肿瘤 凋亡 自噬 二氢青蒿素 Urinary bladder neoplasms Apoptosis Autophagy Dihydroartemisinin
目的 观察二氢青蒿素(DHA)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)联合用药抑制膀胱癌T24细胞增殖并探讨其机制.方法 采用不同浓度(0、12.5、25.0、50.0、100.0μmol/L)的DHA及加入自噬抑制剂3-MA(5 mmol/L)分别处理膀胱癌T24细胞24、48、72 h后,通过噻唑蓝(MTT)实验分析细胞存活率,流式细胞术测定细胞凋亡,Western blot检测凋亡标记蛋白半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3酶原(procaspase-3)、多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(t-PARP)和多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶降解产物(cleaved-PARP)的表达水平.50.0 tμmol/L DHA作用于膀胱癌T24细胞24 h后,丹酰戊二胺(MDC)染色后采用荧光显微镜对自噬进行形态观察,透射电子显微镜观察白噬体超微结构,Western blot检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1和p62的表达.结果 DHA抑制膀胱癌T24细胞的增殖并诱导其凋亡,作用呈浓度和时间依赖性(12.5 μmol/L的DHA 24、48、72 h抑制率依次是5.79%、6.61%、11.09%;25.0 μmol/L的DHA 24、48、72 h抑制率依次是11.25%、15.32%、21.35%;50.0 μmol/L的DHA 24、48、72 h抑制率依次是27.16%、30.66%、47.58%;100.0μmol/L的DHA 24、48、72 h抑制率依次是41.52%、57.52%、74.29%;12.5 μmol/L的DHA 24、48、72 h死亡率依

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