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目的 观察Girdin基因在肝癌细胞表达及抑制其表达对癌细胞增殖、凋亡的影响.方法 Western blot检测人正常肝细胞HL-7702及肝癌Huh7、HepG2、MHCC97H、HCCLM3细胞Girdin的蛋白表达;Girdin的小干扰RNA(siRNA)通过LipofectamineTM2000转染HCCLM3细胞,并设置阴性对照组和空白对照组,收集转染48 h的细胞,Westemblot检测Girdin、细胞核增殖抗原(Ki-67)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)家族含Caspase-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)家族促凋亡基因bcl-2相关X蛋白(bax)及酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子3(STAT3)通路磷酸化的酪氨酸激酶2(p-JAK2)、磷酸化的信号转导与转录激活因子3(p-STAT3)的蛋白表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测转染的24、48、72 h各组细胞的活力;流式细胞术检测转染48 h的细胞凋亡率.结果 Girdin在HepG2(0.355±0.043)、HCCLM3 (0.599±0.068)、MHCC97H (0.462±0.055)、Huh7 (0.378±0.049)肝癌细胞中的表达均显著高于在正常肝细胞HL-7702(0.112±0.013)的表达(PHepG2 =0.001;PHCCLM3=0.000;PMHCC97H=0.000;PHuh7=0.001);Girdin-siRNA组在24 h(0.247±0.032)、48 h (0.477±0.043)和72 h (0.666±0.073)的细胞活力均显著低于空白对照组(0.385±0.045)、(0.711±0.068)、(

作者:高志强;汪俊峰;陈德华;马雪松;唐哲

来源:中华实验外科杂志 2017 年 34卷 12期

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作者:
高志强;汪俊峰;陈德华;马雪松;唐哲
来源:
中华实验外科杂志 2017 年 34卷 12期
标签:
Girdin基因 肝癌 增殖 凋亡 酪氨酸激酶2/信号转导与转录激活因子3信号通路 Girdin gene Hepatocellular carcinoma Proliferation Apoptosis Janus kinase 2/signal transducer and activators of transcription 3 signaling pathway
目的 观察Girdin基因在肝癌细胞表达及抑制其表达对癌细胞增殖、凋亡的影响.方法 Western blot检测人正常肝细胞HL-7702及肝癌Huh7、HepG2、MHCC97H、HCCLM3细胞Girdin的蛋白表达;Girdin的小干扰RNA(siRNA)通过LipofectamineTM2000转染HCCLM3细胞,并设置阴性对照组和空白对照组,收集转染48 h的细胞,Westemblot检测Girdin、细胞核增殖抗原(Ki-67)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)家族含Caspase-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)家族促凋亡基因bcl-2相关X蛋白(bax)及酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子3(STAT3)通路磷酸化的酪氨酸激酶2(p-JAK2)、磷酸化的信号转导与转录激活因子3(p-STAT3)的蛋白表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测转染的24、48、72 h各组细胞的活力;流式细胞术检测转染48 h的细胞凋亡率.结果 Girdin在HepG2(0.355±0.043)、HCCLM3 (0.599±0.068)、MHCC97H (0.462±0.055)、Huh7 (0.378±0.049)肝癌细胞中的表达均显著高于在正常肝细胞HL-7702(0.112±0.013)的表达(PHepG2 =0.001;PHCCLM3=0.000;PMHCC97H=0.000;PHuh7=0.001);Girdin-siRNA组在24 h(0.247±0.032)、48 h (0.477±0.043)和72 h (0.666±0.073)的细胞活力均显著低于空白对照组(0.385±0.045)、(0.711±0.068)、(

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