目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-10b靶向蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)调控雌激素受体阳性(ER+)MCF-7乳腺癌细胞对他莫昔芬的耐药性.方法 建立ER+且他莫昔芬耐药的MCF-7细胞株MCF-7-TR,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测MCF-7细胞和MCF-7-TR细胞miR-10b表达水平.分别采用噻唑蓝(MTT)法和锥虫蓝法检测转染pre-miR-10b、miR-10b抑制物、siHDAC4的MCF-7细胞、MCF-7-TR细胞在不同他莫昔芬浓度下(0、5、10、15、20、30 μmol/L)的增殖能力和活性.采用Western blot检测HDAC4蛋白表达情况.结果 以MCF-7乳腺癌细胞miR-10b表达水平和侵袭能力作为标准,MCF-7-TR细胞乳腺癌细胞miR-10b表达水平和侵袭能力较MCF-7乳腺癌细胞分别为7.2±1.1和5.3±1.3.随着他莫昔芬浓度增加,各细胞增殖率均呈下降趋势,其中以MCF-7细胞最为明显,其次为MCF-7-TR+ miR-10b抑制物+siHDAC4细胞以及MCF-7+ pre-miR-10b+ HDAC4细胞,而MCF-7-TR+ siHDAC4细胞和MCF-7-TR细胞增殖率下降程度最低.MCF-7细胞和MCF-7-TR+miR-10b抑制物细胞的迁移能力下降最多,而MCF-7+pre-miR-10b+他莫昔芬(10 μmol/L)细胞和MCF-7-TR+他莫昔芬(10 μmol/L)细胞的迁移能力比较差异无统计学意义(t=1.116,P=0.272),但显著高于MCF-7细胞和MCF-7-TR+ miR-10b抑制物细胞(
作者:张建祥;马艳梅;王芳;李建华
来源:中华实验外科杂志 2018 年 35卷 6期