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目的 探讨钙调蛋白(CaM)抑制剂N-(6-氨基己基)-5-氯-1-萘磺酰胺(W-7)通过逆转上皮-间充质转化(EMT)抑制胶质母细胞瘤(GBM)细胞侵袭、迁移能力.方法 细胞计数试剂盒(CCK-8)检测W-7对U87、U251胶质瘤细胞存活率的影响.Transwell侵袭实验检测对照组和W-7处理组穿过小室底膜的U87、U251细胞数目.划痕愈合实验检测各组U87、U251细胞相对迁移距离.Western blot法检测各组U87、U251细胞中上皮标志物(E-钙黏蛋白)和间质标志物(N-钙黏蛋白、波形蛋白)以及转录因子(ZEB1蛋白)的相对表达水平.倒置显微镜下观察各组U87、U251细胞形态变化.免疫荧光检测各组胶质瘤细胞N-cadherin的表达差异.结果 W-7处理组穿过小室底膜的U87、U251细胞数少于对照组(P=0.001);W-7处理组U87、U251细胞愈合速率低于对照组,24 h后差异均有统计学意义(P=0.001、0.006).W-7处理组中U87、U251细胞E-钙黏蛋白的相对表达水平高于对照组(P =0.001),而N-钙黏蛋白、ZEB1、波形蛋白相对表达水平低于对照组(P=0.001).与对照组比较,W-7处理组U87、U251细胞形态呈椭圆形、圆形改变,细胞迁移能力减弱.结论 CaM抑制剂W-7能够通过逆转EMT抑制GBM细胞的侵袭、迁移能力.

作者:苑锋;李涛;刘沛东;童鹿青;易立;海龙;陶震楠;马海文;解杨;刘宇恒;杨学军

来源:中华实验外科杂志 2018 年 35卷 11期

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作者:
苑锋;李涛;刘沛东;童鹿青;易立;海龙;陶震楠;马海文;解杨;刘宇恒;杨学军
来源:
中华实验外科杂志 2018 年 35卷 11期
标签:
钙调蛋白 胶质母细胞瘤 上皮-间充质转化 侵袭 迁移 Camoldulin Glioblastoma Epithelial-to-mesenchymal like transition Invasion Migration
目的 探讨钙调蛋白(CaM)抑制剂N-(6-氨基己基)-5-氯-1-萘磺酰胺(W-7)通过逆转上皮-间充质转化(EMT)抑制胶质母细胞瘤(GBM)细胞侵袭、迁移能力.方法 细胞计数试剂盒(CCK-8)检测W-7对U87、U251胶质瘤细胞存活率的影响.Transwell侵袭实验检测对照组和W-7处理组穿过小室底膜的U87、U251细胞数目.划痕愈合实验检测各组U87、U251细胞相对迁移距离.Western blot法检测各组U87、U251细胞中上皮标志物(E-钙黏蛋白)和间质标志物(N-钙黏蛋白、波形蛋白)以及转录因子(ZEB1蛋白)的相对表达水平.倒置显微镜下观察各组U87、U251细胞形态变化.免疫荧光检测各组胶质瘤细胞N-cadherin的表达差异.结果 W-7处理组穿过小室底膜的U87、U251细胞数少于对照组(P=0.001);W-7处理组U87、U251细胞愈合速率低于对照组,24 h后差异均有统计学意义(P=0.001、0.006).W-7处理组中U87、U251细胞E-钙黏蛋白的相对表达水平高于对照组(P =0.001),而N-钙黏蛋白、ZEB1、波形蛋白相对表达水平低于对照组(P=0.001).与对照组比较,W-7处理组U87、U251细胞形态呈椭圆形、圆形改变,细胞迁移能力减弱.结论 CaM抑制剂W-7能够通过逆转EMT抑制GBM细胞的侵袭、迁移能力.

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