目的 观察电脉冲下肝癌细胞半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3的表达水平及损伤效应.方法 按脉冲电场强度分为10组,对Hep-G2肝癌细胞脉冲放电,通过检测细胞Caspase-3活性、增殖活力、凋亡率及细胞色素C(Cyt C)、Caspase-3活化蛋白(Cleaved-Caspase-3)和半胱氨酸蛋白酶激活的DNA酶(CAD)的表达水平,判断损伤效应.结果 Caspase-3在脉冲处理后的肝癌细胞中高表达,其表达水平在750～1 750 V/cm随场强增加呈上升趋势(P＜0.01),在1 750 ～2 000 V/cm时达到顶峰(P＞0.05),随后场强继续上升,表达水平逐渐下降.电脉冲对细胞抑制能力与场强呈正相关,当处于2 250～2 750 V/cm时,增殖活力降至最低(P＞0.05).脉冲损伤包括诱导凋亡和坏死,凋亡效应于1 750 ～2 000 V/cm时达到峰值(P＞0.05),坏死效应在高于2 000 V/cm时显著上升,并于2 750 V/cm时达峰.蛋白质印迹法(Western blot)提示脉冲电场可引发Cyt C、Cleaved-Caspase-3及CAD表达上调(P＜0.05).结论 高频电脉冲可引发肝癌细胞Caspase-3表达增强,同时激活Cyt C信号通路诱导凋亡;当场强设定为1 750～2 000 V/cm时凋亡效应最明显.
作者：程宇；王国经；王进；周丁华
来源：中华实验外科杂志 2019 年 36卷 5期
