目的 观察转化生长因子-β1(TGF-β1)在肝癌细胞对Wnt信号通路的调节作用.方法 对肝癌细胞株HepG2细胞使用5、10、20μg/L TGF-β1重组蛋白诱导,48 h后细胞计数检测肝癌细胞增殖.蛋白质印迹法(Western blot)方法检测上述各组上皮-间充质转化(EMT)标志蛋白及Wnt通路中相关蛋白表达.对肝癌细胞进行β-连环蛋白(β-catenin)小干扰RNA(siRNA)沉默,及β-catenin siRNA沉默加TGF-β1重组蛋白诱导,分别检测EMT标志蛋白及Wnt通路中相关蛋白表达,并进行对比分析.实验数据以SPSS 18.0软件进行统计分析,实验图片采用Image J软件进行灰度分析,目的蛋白相对表达量以目的蛋白/内参蛋白的比值表示.结果 TGF-β1可促进肝癌细胞体外增殖,且与TGF-β1处理浓度呈明显相关(5μg/L实验组P<0.01,10 μg/L实验组P<0.01,20 μg/L实验组P<0.01).TGF-β1处理组的肝癌细胞上皮细胞标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达下调;间质标志蛋白波形蛋白(Vimentin)和β-catenin表达上调,且与TGF-β1处理浓度呈明显相关(E-cadherin对照组:1.000±0.058;5μg/L实验组:0.937±0.049,P>0.05;10 μg/L实验组:0.490±0.046,P<0.01;20 μg/L实验组:0.520 ±0.035,P<0.01.Vimentin对照组:1.000 ±0.058;5μ g/L实验组:1.097±0.042,P>0.05;10
作者:解刚强;范永刚;王伟;翟景明;姚国良;刘可峰;封冰;张贝克
来源:中华实验外科杂志 2019 年 36卷 6期