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目的 探讨内质网应激蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核起始因子2 α(eIF-2αα/转录激活因子6(ATF6)通路与大鼠肝癌细胞增殖与迁移的关系.方法 采用二乙基亚硝胺(DEN)间断给药法建立大鼠肝癌模型,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠肝脏的形态学变化.采用免疫组织化学法检测大鼠肝癌组织中PERK和eIF-2α蛋白的表达;用无水乙醇诱导正常肝细胞(LO2)和高分化肝癌细胞株(CBRH-7919)构建内质网应激细胞模型;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖;采用划痕实验检测细胞的迁移和侵袭能力;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测肝癌组织中PERK、eIF-2a、ATF6、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)蛋白的表达,应用SPSS 22.0统计软件分析,肝癌组织相关分析结果采用单因素方差分析和t检验.结果 无水乙醇诱导LO2和CBRH-7919细胞发生内质网应激后,LO2和CBRH-7919细胞细胞迁移能力显著降低,差异有统计学意义(tLO2细胞=8.910,P<0.01;tCBRH-7919细胞=30.010,P<0.01).LO2和CBRH-7919细胞存活率显著降低,差异有统计学意义(tLO2细胞=11.840,P<0.01;tCBRH-7919细胞=19.080,P<0.01).实验组肝癌组织内PERK、eIF-2a、ATF6、Caspase-3蛋白表达显著升高,bcl-2蛋白表达显著降低(tPERK=8.070,P<0.0

作者:贺艳平;李江怀

来源:中华实验外科杂志 2019 年 36卷 10期

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作者:
贺艳平;李江怀
来源:
中华实验外科杂志 2019 年 36卷 10期
标签:
肝癌 内质网应激 蛋白激酶R样内质网激酶 真核起始因子2α 转录激活因子6 Liver cancer Endoplasmic reticulum stress Protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase Eukaryotic initiation factor 2α Transcriptional activator-6
目的 探讨内质网应激蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核起始因子2 α(eIF-2αα/转录激活因子6(ATF6)通路与大鼠肝癌细胞增殖与迁移的关系.方法 采用二乙基亚硝胺(DEN)间断给药法建立大鼠肝癌模型,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠肝脏的形态学变化.采用免疫组织化学法检测大鼠肝癌组织中PERK和eIF-2α蛋白的表达;用无水乙醇诱导正常肝细胞(LO2)和高分化肝癌细胞株(CBRH-7919)构建内质网应激细胞模型;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖;采用划痕实验检测细胞的迁移和侵袭能力;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测肝癌组织中PERK、eIF-2a、ATF6、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)蛋白的表达,应用SPSS 22.0统计软件分析,肝癌组织相关分析结果采用单因素方差分析和t检验.结果 无水乙醇诱导LO2和CBRH-7919细胞发生内质网应激后,LO2和CBRH-7919细胞细胞迁移能力显著降低,差异有统计学意义(tLO2细胞=8.910,P<0.01;tCBRH-7919细胞=30.010,P<0.01).LO2和CBRH-7919细胞存活率显著降低,差异有统计学意义(tLO2细胞=11.840,P<0.01;tCBRH-7919细胞=19.080,P<0.01).实验组肝癌组织内PERK、eIF-2a、ATF6、Caspase-3蛋白表达显著升高,bcl-2蛋白表达显著降低(tPERK=8.070,P<0.0

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