目的:探讨泛素连接酶FBW7是否在肝癌细胞HepG2中参与泛素化修饰锌指转录因子Snail而影响侵袭和转移。方法:通过转染沉默HepG2细胞(购自武汉普诺赛生命技术公司)FBW7的表达48 h后,实验组为沉默FBW7的HepG2细胞,对照组为空白载体转染,分别检测FBW7、Snail mRNA及蛋白表达。通过划痕实验和Transwell方法检测下调FBW7对HepG2细胞侵袭和转移的影响。组间比较采用
t检验。
结果:转染沉默HepG2细胞FBW7基因表达后,FBW7 mRNA(0.31±0.06比0.98±0.25,
t=-7.813,
P<0.05)及蛋白(0.29±0.03比1.00±0.00,
t=-63.967,
P<0.05)表达均下调,差异有统计学意义;锌指转录因子Snail mRNA(1.59±0.06比0.99±0.07,
t=18.630,
P<0.05)及蛋白(1.75±0.20比1.00±0.00,
t=11.323,
P<0.05)表达均上调,差异有统计学意义;划痕实验显示HepG2细胞迁移能力增加(256.00±35.21比185.00±22.45,
t=4.855,
P<0.05),Transwell实验显示HepG2细胞穿透数目增多[(271.00±55.32)个比(162.00±33.14)个,
t=4.138,
P<0.05],差异均有统计学意义。
结论:FBW7可能通过泛素化修饰Snail而抑制肝癌细胞HepG2的侵袭转移。
作者:朱云峰;余芃;杨俭;杨家印
来源:中华实验外科杂志 2020 年 37卷 6期