目的:研究长链非编码RNA(lncRNA) FOXD2-AS1在骨肉瘤组织及细胞株中的表达及对细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的作用与机制。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测36例骨肉瘤组织与癌旁组织中FOXD2-AS1的表达量并分析其表达与临床特征的关系。检测FOXD2-AS1在骨肉瘤细胞株(MG63,Saos-2,U2-OS,143B)和人成骨细胞株(hFOB1.19)的表达,并选取两种高表达的细胞株敲降其表达,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)流式细胞术、Transwell实验检测增殖、凋亡、侵袭和迁移,并通过RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA-IP)、蛋白质印迹法(Western blot)和ChIP检测FOXD2-AS1对EZH2和p21的影响。结果:FOXD2-AS1在骨肉瘤组织中的表达高于癌旁组织(
t=17.900,
P<0.01);并且在体积大、TNM分期高的骨肉瘤组织中表达量更显著(
χ2=4.208、9.257,
P<0.01)。FOXD2-AS1在骨肉瘤细胞株中的表达量均高于人成骨细胞株(
t=14.540、9.970、5.890,
P<0.01),尤其是在MG63和Saos-2细胞株中,敲降FOXD2-AS1的表达能够抑制增殖(
P<0.05)、促进凋亡(
P<0.01)和抑制侵袭和迁移(
P<0.01)。RNA-IP、Western blot和ChIP
作者:任志鹏;赵荷珺;康宇翔;张净宇;刘艳成;胡永成
来源:中华实验外科杂志 2020 年 37卷 11期