目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)新型抑制剂GNE-477对胶质瘤耐药细胞的增殖和凋亡的影响及其分子机制。方法:通过浓度梯度递增法建立胶质瘤替莫唑胺(TMZ)耐药的模型细胞株，并命名为U87/TMZ。用不同浓度的GNE-477(0、4、8、16、32、64、128 μmol/L)处理耐药细胞株之后，通过细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测U87/TMZ细胞增殖活性；接着将细胞分为U87/TMZ+二甲基亚砜(DMSO)(对照组)和U87/TMZ+GNE-477(实验组)，应用膜联蛋白V-PE/7-ADD染色和流式细胞仪来检测细胞凋亡，明确GNE-477对胶质胞瘤耐药细胞凋亡的影响。应用蛋白质印迹法(Western blot)检测两组之间凋亡相关基因[B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)]以及PI3K/mTOR信号通路关键靶点Akt和p-Akt的蛋白表达。结果:CCK-8结果显示，U87+DMSO组吸光度( A)值(0.96±0.07)低于U87/TMZ+TMZ组 A值(0.974±0.03)，两组之间差异无统计学意义( t＝0.32， P>0.05)；U87+TMZ组 A值0.46±0.09低于U87+DMSO组 A值(0.96±0.07)，差异有统计学意义( t＝7.60， P<0.05)。GNE-477作用24 h后U87/TMZ细胞株增殖抑制浓度(IC 50)为7.981 μmol/L。流式细胞术结果显示，GNE-477处理U

作者：潘旭炎；苏忠周；张红波；宗志涛

来源：中华实验外科杂志 2022 年 39卷 4期