目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA) GAS5对耐阿霉素乳腺癌细胞的影响及其分子机制。方法:采用浓度梯度(0.50、1.00和4.00 μg/ml) μm阿霉素长期处理MCF-7乳腺癌细胞(河南中医药大学第五临床医学院的),建立阿霉素耐药的细胞株MCF-7/ADR,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞lncRNA GAS5表达水平;采用对照lncRNA和lncRNA GAS5慢病毒感染MCF-7/ADR细胞株,构建lncRNA对照和lncRNA GAS5过表达细胞系(lncRNA对照组和lncRNA GAS5组)。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)测定两组细胞对阿霉素的敏感性;采用平板克隆形成实验分析两组细胞细胞克隆形成率;采用流式细胞术分析两组细胞的凋亡;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析lncRNA GAS5的靶基因;采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析lncRNA GAS5靶蛋白的表达水平。计量数据比较采用
t检验。
结果:采用阿霉素浓度递增法成功构建对阿霉素耐药的乳腺癌细胞株MCF-7/ADR。MCF-7乳腺癌细胞lncRNA GAS5表达水平(1.09±0.11)明显高于MCF-7/ADR细胞lncRNA GAS5表达水平(0.51±0.09),差异有统计学意义(
t=9.127,
P<0.05)。lncRNA对照组细胞吸光值(1.96±0.09)明显高于lncRNA GAS5组(1.42±0.09),差异有统计学意义(
作者:姜丽娜;祁川川;陈艳丽;刘薇
来源:中华实验外科杂志 2022 年 39卷 6期