目的:观察缺氧通过抑制血管内皮细胞生长因子受体结合蛋白2接头蛋白2(GAB2)的表达，导致下肢动脉内皮损伤的分子机制。方法:血管标本取材于上海交通大学医学院附属仁济医院血管外科，粥样硬化股动脉标本取自于下肢动脉粥样硬化闭塞(ASO)截肢患者，正常动脉血管取自于意外车祸截肢患者。通过组织免疫荧光(IF)、实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测正常动脉血管与ASO病变动脉血管内膜组织中GAB2表达差异。采用RT-qPCR和Western blot检测缺氧条件下内皮细胞中微小RNA(miR)-30a及GAB2表达改变。内皮细胞中沉默或过表达GAB2后Western blot检测自噬标志物LC3 Ⅱ/Ⅰ的表达。组间比较采用 t检验。 结果:组织免疫荧光(IF)和Western blot检测显示内皮细胞自噬水平ASO组织高于正常组织(5.252±0.449， t＝15.950， P<0.01；1.805±0.210， t＝5.471， P<0.01)，同时GAB2表达ASO组织低于正常组织(0.349±0.028， t＝32.120， P<0.01；0.399±0.059， t＝5.180， P<0.01)；体外实验显示内皮细胞中GAB2表达缺氧组低于对照组(0.668±0.088， t＝3.774， P<0.01)；内皮细胞自噬标志物LC3 Ⅱ/Ⅰ水平沉默GAB2组

作者：姚永杰；李世伦；朱经谱；王预立；张岚

来源：中华实验外科杂志 2023 年 40卷 5期