目的:探讨微小RNA-217(miR-217)对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响途径。方法:采用反转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人正常结肠上皮细胞NCM460和人结直肠癌细胞SW620、RKO、HT-29、HCT116中miR-217表达水平。将miR-217模拟物(mimic)与阴性对照(mimic NC)分别转染于RKO细胞系,检测miR-217表达水平。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)与平板克隆实验检测细胞增殖活力;采用划痕愈合实验、Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力;采用RT-qPCR与蛋白质印迹法(Western blot)检测沉默信息调节因子1(SIRT1) mRNA与蛋白表达水平。两组间比较采用
t检验,多组间比较采用单因素方差分析(ANOVA)。
结果:miR-217在人结直肠癌细胞系中表达水平降低,其中RKO细胞系明显低于NCM460细胞系[(0.286±0.022)倍比(1.000±0.090)倍,
t=13.360,
P<0.01],差异有统计学意义。RKO细胞系转染miR-217 mimic后,miR-217表达水平高于NC组[(5.276±0.437)倍比(1.000±0.168)倍,
t=15.820,
P<0.01],差异有统计学意义。CCK-8实验表明miR-217 mimic组细胞24、48、72 h吸光度值低于NC组[(0.867±0.030)倍比(1.260±0.0222)倍,
t=18.440,
P<0.01],差异有统计学意义。平
作者:余晓明;赵小乐;裴富雍;林传俊;何梓芸;程菲杨;姜进平;汤守元;罗海平;兰国玉
来源:中华实验外科杂志 2023 年 40卷 7期