目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)在肺癌放疗抵抗中的作用,并观察lncRNA微小RNA(miR)-4453对肺癌放疗抵抗的影响。方法:H460细胞(大细胞肺癌细胞)购自上海中国科学院细胞研究所。应用梯度增加X射线剂量法对H460细胞反复照射,剂量分别为前3次4 Gy,中4次6 Gy,后3次8 Gy,累积剂量60 Gy。照射完成后放疗抵抗株命名为H460R细胞。通过高通量测序,筛选出亲本株H460细胞与抵抗株H460R细胞差异表达的lncRNAs。利用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术,对H460细胞与H460R细胞差异表达的lncRNAs和mRNAs进行验证。对放疗抵抗细胞株H460R细胞分别转染干扰序列[小干扰RNA(siRNA)-miR-4453]和对照序列(siRNA-NC)。采用Transwell法分析H460细胞、H460R细胞、siRNA-NC细胞和siRNA-miR-4453细胞的迁移能力。采用流式细胞术分析siRNA-NC细胞和siRNA-miR-4453细胞凋亡比例。利用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测H460细胞、H460R细胞、siRNA-NC细胞和siRNA-miR-4453细胞放疗剂量的半数抑制浓度(IC
50)值。组间比较采用
t检验。
结果:放疗抵抗株H460R细胞的IC
50值高于对照组H460细胞的IC
50值[(28.580±4.181) Gy比(7.788±0.352) Gy,
t=8.58,
P<0.05]。H460R细胞株穿过Tr
作者:刘玉凤;凌春华;殷红;黄锦宏
来源:中华实验外科杂志 2023 年 40卷 8期