目的:探讨微小RNA-579-3p(miR-579-3p)/含锌指和BTB域4(ZBTB4)通路在胃癌上皮-间充质转化(EMT)中的作用机制。方法:生物信息学筛选胃癌与癌旁组织差异表达的微小RNA(miRNA);实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测50例患者胃癌和癌旁癌旁组织中miR-579-3p、ZBTB4表达;检测胃上皮细胞株GES-1和胃癌细胞株HGC27、AGS、MKN45中miR-579-3p的表达,分析miR-579-3p与临床病理特征的关系。生物信息学分析miR-579-3p靶基因。双荧光素酶报告基因验证miR-579-3p与ZBTB4的调控关系。应用miR-579-3p抑制物(inhibitor)干扰HGC27细胞株miR-579-3p表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)法、划痕实验、Transwell小室实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力;RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测mRNA和蛋白表达水平。采用
t检验、
χ2检验分析数据。
结果:生物信息学筛选后RT-qPCR检测结果发现miR-579-3p在胃癌组织中表达显著高于癌旁组织(3.259±1.307比1.326±0.419,
t=9.959,
P<0.01),miR-579-3p表达与胃癌分化和淋巴结转移明显相关(
χ2=4.500、7.714,
P<0.05);miR-579-3p在胃癌细胞株表达均高于GES-1(
P<0.01)。转染miR-579-3p抑制剂的HGC-27细胞活性(0.500±0.068
作者:刘文博;王冰雨;李勇;李英杰;翟建宁;孔凡铭;孙楠;檀碧波
来源:中华实验外科杂志 2024 年 41卷 2期