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目的研究线粒体细胞色素C的释放在ATP耗竭导致的肾小管上皮细胞凋亡中的作用和机制.方法应用代谢抑制剂暂时性阻断细胞内ATP的生成,诱导细胞凋亡.利用JC-1测定线粒体膜电位的变化.以间接免疫荧光和Western印迹检测细胞色素C在细胞内的分布.荧光肽法测定Caspase3的活性.琼脂糖凝胶电泳分析DNA碎解.结果肾小管上皮细胞内ATP耗竭时,线粒体膜电位显著降低,细胞浆内细胞色素C的含量增多,Caspase 3活性增强.细胞内ATP再恢复时,细胞色素C的释放和Caspase 3活性继续增加,并出现DNA的碎解.结论肾小管上皮细胞ATP耗竭时,线粒体细胞色素C的释放在介导Caspase依赖的细胞凋亡通路中发挥重要作用.

作者:毛海萍;余学清;杨琼琼;尹培达;李芳红;K.L Ruchalski;J.H.Schwartz;S.C.Borkan;汪一汗

来源:中华肾脏病杂志 2003 年 19卷 2期

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作者:
毛海萍;余学清;杨琼琼;尹培达;李芳红;K.L Ruchalski;J.H.Schwartz;S.C.Borkan;汪一汗
来源:
中华肾脏病杂志 2003 年 19卷 2期
标签:
凋亡 细胞色素C Caspase 3 线粒体 肾小管上皮细胞
目的研究线粒体细胞色素C的释放在ATP耗竭导致的肾小管上皮细胞凋亡中的作用和机制.方法应用代谢抑制剂暂时性阻断细胞内ATP的生成,诱导细胞凋亡.利用JC-1测定线粒体膜电位的变化.以间接免疫荧光和Western印迹检测细胞色素C在细胞内的分布.荧光肽法测定Caspase3的活性.琼脂糖凝胶电泳分析DNA碎解.结果肾小管上皮细胞内ATP耗竭时,线粒体膜电位显著降低,细胞浆内细胞色素C的含量增多,Caspase 3活性增强.细胞内ATP再恢复时,细胞色素C的释放和Caspase 3活性继续增加,并出现DNA的碎解.结论肾小管上皮细胞ATP耗竭时,线粒体细胞色素C的释放在介导Caspase依赖的细胞凋亡通路中发挥重要作用.

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