目的 观察信号转导与转录激活子1(STAT1) siRNA转染后高糖培养人肾小球系膜细胞(HMC)的增殖情况及细胞内STAT1、磷酸化(p)STAT1、STAT3、p-STAT3蛋白及下游TGF-β31的表达变化,探讨高糖状态下STAT1和STAT3活性变化及STAT亚型变化对TGF-β1的影响.方法 设计并合成针对STAT1基因的3个特异性siRNA序列(STAT1-siRNA),应用Lipofectamine 2000转染试剂将STAT1-siRNA转染入HMC.激光共聚焦显微镜鉴定转染效率,应用Western印迹、实时定量PCR法筛选最有效抑制STAT1表达的干扰序列用于后续实验.转染有效干扰序列24 h后,用25 mmol/L葡萄糖刺激24、48、72 h,MTT法检测各组系膜细胞的增殖情况；Western印迹法检测各组细胞STAT1、p-STAT1、STAT3、p-STAT3蛋白的表达；ELISA法检测TGF-β1的表达.结果 与对照组相比,高糖可刺激HMC增殖,HMC的p-STAT1、p-STAT3及TGF-β1表达上调(P＜0.05).转染STAT1-siRNA后高糖刺激HMC,p-STAT3及TGF-β1的表达进一步增高(P＜0.05).结论 高糖可以通过磷酸化方式激活HMC的JAK-STAT信号转导通路.转染STAT1-siRNA后,系膜细胞增殖增多,STAT3活性增强.高糖促进HMC分泌TGF-β1,转染STAT1-siRNA后,TGF-β1分泌进一步增加,与肾脏纤维化有关.

作者：郑晓玉；焦素敏；王力宁；陈莹；杨雪；张瑾；杨爽；高鑫然；范秋灵

来源：中华肾脏病杂志 2013 年 29卷 1期