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目的 研究A激酶锚定蛋白(AKAP1)在高糖诱导足细胞线粒体分裂中的作用及可能的信号转导通路.方法 体外培养条件永生性人足细胞,完全分化并同步化处理后进行后续实验.实验分组:(1)葡萄糖浓度分为5、15、25、35 mmol/L组刺激足细胞48 h;(2)高糖(35 mmol/L)培养基分别刺激足细胞12、24、36、48 h;(3)正常对照组(5 mmol/L葡萄糖)、高渗对照组(30 mmol/L甘露醇+5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(35 mmol/L葡萄糖)、高糖(35 mmol/L葡萄糖)+AKAP1 siRNA组.免疫荧光染色检测足细胞中AKAP1的表达和分布,Western印迹检测足细胞中AKAP1、线粒体动力相关蛋白1(dynamin related protein1,Drp1)、p-Drp1蛋白水平.Mitotracker Red染色观察各组足细胞线粒体形态,对长度、纵横比、形状系数定量分析.流式细胞术评价足细胞凋亡水平.结果 与正常组比较,高糖刺激导致足细胞凋亡增加(P<0.05),线粒体分裂增加、纵横比及形状系数降低(均P< 0.05),AKAP1蛋白表达水平、p-Drp1/Drp1以时间、浓度依赖方式增加(P<0.05);与高糖组比较,AKAP1 siRNA转染后线粒体分裂减少,线粒体纵横比及形状系数升高(均P< 0.05),足细胞凋亡减少;AKAP1蛋白水平及p-Drp1/Drp1下降(P<0.05);上述各项高渗对照组与正常对照组差异均无统计学意义(均P> 0.05).结论 高

作者:陶娱;马屹茕;陈朝威;杨倩;丁国华

来源:中华肾脏病杂志 2018 年 34卷 7期

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作者:
陶娱;马屹茕;陈朝威;杨倩;丁国华
来源:
中华肾脏病杂志 2018 年 34卷 7期
标签:
足细胞 线粒体 糖尿病肾病 A激酶锚定蛋白1 动力相关蛋白1 Podocyte Mitochondrial Diabetic nephropathy A kinase anchoring protein 1 Dynamin-related protein 1
目的 研究A激酶锚定蛋白(AKAP1)在高糖诱导足细胞线粒体分裂中的作用及可能的信号转导通路.方法 体外培养条件永生性人足细胞,完全分化并同步化处理后进行后续实验.实验分组:(1)葡萄糖浓度分为5、15、25、35 mmol/L组刺激足细胞48 h;(2)高糖(35 mmol/L)培养基分别刺激足细胞12、24、36、48 h;(3)正常对照组(5 mmol/L葡萄糖)、高渗对照组(30 mmol/L甘露醇+5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(35 mmol/L葡萄糖)、高糖(35 mmol/L葡萄糖)+AKAP1 siRNA组.免疫荧光染色检测足细胞中AKAP1的表达和分布,Western印迹检测足细胞中AKAP1、线粒体动力相关蛋白1(dynamin related protein1,Drp1)、p-Drp1蛋白水平.Mitotracker Red染色观察各组足细胞线粒体形态,对长度、纵横比、形状系数定量分析.流式细胞术评价足细胞凋亡水平.结果 与正常组比较,高糖刺激导致足细胞凋亡增加(P<0.05),线粒体分裂增加、纵横比及形状系数降低(均P< 0.05),AKAP1蛋白表达水平、p-Drp1/Drp1以时间、浓度依赖方式增加(P<0.05);与高糖组比较,AKAP1 siRNA转染后线粒体分裂减少,线粒体纵横比及形状系数升高(均P< 0.05),足细胞凋亡减少;AKAP1蛋白水平及p-Drp1/Drp1下降(P<0.05);上述各项高渗对照组与正常对照组差异均无统计学意义(均P> 0.05).结论 高

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