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目的 探讨microRNA-20a(miR-20a)对心肌糖代谢功能的影响,揭示miR-20a调节胰岛素抵抗和糖尿病等代谢性疾病的机制.方法 以大鼠H9C2心肌细胞为研究对象,建立胰岛素抵抗的细胞模型,应用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测胰岛素抵抗心肌细胞内差异表达的microRNAs;采用miRanda靶基因预测分析筛选与葡萄糖转运蛋白4(Glut4)基因具有互补结合位点的microRNA;应用细胞转染技术在正常和胰岛素抵抗心肌细胞内分别转染miR-20a类似物与抑制物及相应的阴性对照物,采用qRT-PCR检测各组内miR-20a和Glut4基因表达水平,Western blotting法检测各组内Glut4蛋白表达水平;应用葡萄糖消耗和摄取实验检测各组内葡萄糖代谢水平.采用单因素方差分析及t检验进行数据分析.结果 胰岛素抵抗细胞内miR-20a相对表达量明显高于正常对照组(3.14±0.12比1.00±0.00,t=17.79,P<0.01),Glut4基因和蛋白相对表达明显低于正常对照组(0.58±0.09比1.00±0.00,t=4.71,P<0.05;0.29±0.04比1.00±0.00,t=17.18,P<0.01),miR-20a与人、大鼠、小鼠的Glut43′UTR均存在互补结合位点.转染miR-20a类似物组Glut4基因和蛋白表达显著低于对照组(0.36±0.11比1.00±0.00,t=5.79,P<0.05;0.25±0.05比1.00±0.00,t=13.87,P<0.01);葡萄糖消耗和摄取水平显

作者:沈男男;钱华;王伶;劳国琴;张谊芳;王佳良

来源:中华糖尿病杂志 2019 年 11卷 10期

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作者:
沈男男;钱华;王伶;劳国琴;张谊芳;王佳良
来源:
中华糖尿病杂志 2019 年 11卷 10期
标签:
葡萄糖转运蛋白4 H9C2细胞 microRNA-20a 糖代谢 Glucose transporter protein 4 H9C2 cells MicroRNA-20a Glucose metabolism
目的 探讨microRNA-20a(miR-20a)对心肌糖代谢功能的影响,揭示miR-20a调节胰岛素抵抗和糖尿病等代谢性疾病的机制.方法 以大鼠H9C2心肌细胞为研究对象,建立胰岛素抵抗的细胞模型,应用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测胰岛素抵抗心肌细胞内差异表达的microRNAs;采用miRanda靶基因预测分析筛选与葡萄糖转运蛋白4(Glut4)基因具有互补结合位点的microRNA;应用细胞转染技术在正常和胰岛素抵抗心肌细胞内分别转染miR-20a类似物与抑制物及相应的阴性对照物,采用qRT-PCR检测各组内miR-20a和Glut4基因表达水平,Western blotting法检测各组内Glut4蛋白表达水平;应用葡萄糖消耗和摄取实验检测各组内葡萄糖代谢水平.采用单因素方差分析及t检验进行数据分析.结果 胰岛素抵抗细胞内miR-20a相对表达量明显高于正常对照组(3.14±0.12比1.00±0.00,t=17.79,P<0.01),Glut4基因和蛋白相对表达明显低于正常对照组(0.58±0.09比1.00±0.00,t=4.71,P<0.05;0.29±0.04比1.00±0.00,t=17.18,P<0.01),miR-20a与人、大鼠、小鼠的Glut43′UTR均存在互补结合位点.转染miR-20a类似物组Glut4基因和蛋白表达显著低于对照组(0.36±0.11比1.00±0.00,t=5.79,P<0.05;0.25±0.05比1.00±0.00,t=13.87,P<0.01);葡萄糖消耗和摄取水平显

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