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目的明确5C5蛋白为分化抗原,检测其在人免疫细胞的表达,以及它的信号传导作用. 方法用5C5蛋白免疫小鼠,制备抗5C5蛋白的单抗.用反义技术制备5C5蛋白表达抑制的3D5细胞.用免疫荧光染色和Western印迹确定5C5单抗的特异性.用胞膜蛋白免疫沉淀和流式细胞术确定其分化抗原的性质.用双色免疫荧光染色流式细胞术检测5C5分化抗原在多种人免疫细胞的表达.用Fura-3-AM试剂作探针,用激光共聚焦显微镜观察胞内Ca2+浓度的变化. 结果制备了抗5C5蛋白的特异性单抗.用5C5单抗作探针,从3D5细胞膜免疫沉淀到1条相对分子质量(Mr)为19×103的蛋白带,并在活3D5细胞见阳性免疫荧光染色.5C5分化抗原在人周围血CD19+、CD14+、CD4+、CD8+和CD56+细胞的表达率分别为(33.47±7.9)
作者：汪哌；刘音；马凤蓉；史耕先；赵方萄；朱立平
来源：中华微生物学和免疫学杂志 2003 年 23卷 5期
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