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目的:研究结核DNA疫苗肌肉注射加电转染不同免疫方案的免疫效果,获得DNA疫苗肌肉注射加电转染免疫的最佳方案。方法40只BALB/c小鼠随机分为4组:(1)生理盐水组。(2)50μg Ag85A DNA组。(3)100μg Ag85A DNA组。上述3组分别肌肉注射加电转染免疫3次。(4)混合Ag85A DNA免疫组,第1和3次各肌肉注射加电转染10μg Ag85A DNA,第2次肌肉注射加电转染100μg Ag85A DNA,每2周免疫1次。最后1次免疫后2周、6周每组各杀5只小鼠,用ELISA方法检测小鼠脾细胞培养上清中IFN-γ和IL-4水平;用流式细胞术检测小鼠全血单个核细胞分泌IFN-γ的Th1细胞和分泌IL-4的Th2细胞比值;用定量RT-PCR检测小鼠肌肉电转染部位Ag85A DNA的含量。用ELISA方法检测小鼠免疫前、第1~3次免疫后10 d小鼠血清特异性抗体水平。结果免疫结束后2周,小鼠脾淋巴细胞产生IFN-γ水平:混合Ag85 A DNA免疫组[(703.66±394.74) pg/ml]和50μg Ag85A DNA组[(648.60±439.41) pg/ml]明显高于生理盐水组[(70.58±108.76) pg/ml](t值分别为3.975、3.629,P值分别为0.0004、0.0010)和100μg Ag85A DNA组[(86.08±135.73) pg/ml](t值分别为3.878、3.532,P值分别为0.0005、0.0013),但混合Ag85A DNA免疫组和50μg A

作者:梁艳;肖漓;张晓燕;白雪娟;阳幼荣;高钰;张俊仙;陈丹;王兰;史迎昌;李忠明;吴雪琼

来源:中华微生物学和免疫学杂志 2014 年 9期

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作者:
梁艳;肖漓;张晓燕;白雪娟;阳幼荣;高钰;张俊仙;陈丹;王兰;史迎昌;李忠明;吴雪琼
来源:
中华微生物学和免疫学杂志 2014 年 9期
标签:
结核分枝杆菌 DNA疫苗 电转染 免疫 Mycobacterium tuberculosis DNA vaccine Electroporation Immune strategy
目的:研究结核DNA疫苗肌肉注射加电转染不同免疫方案的免疫效果,获得DNA疫苗肌肉注射加电转染免疫的最佳方案。方法40只BALB/c小鼠随机分为4组:(1)生理盐水组。(2)50μg Ag85A DNA组。(3)100μg Ag85A DNA组。上述3组分别肌肉注射加电转染免疫3次。(4)混合Ag85A DNA免疫组,第1和3次各肌肉注射加电转染10μg Ag85A DNA,第2次肌肉注射加电转染100μg Ag85A DNA,每2周免疫1次。最后1次免疫后2周、6周每组各杀5只小鼠,用ELISA方法检测小鼠脾细胞培养上清中IFN-γ和IL-4水平;用流式细胞术检测小鼠全血单个核细胞分泌IFN-γ的Th1细胞和分泌IL-4的Th2细胞比值;用定量RT-PCR检测小鼠肌肉电转染部位Ag85A DNA的含量。用ELISA方法检测小鼠免疫前、第1~3次免疫后10 d小鼠血清特异性抗体水平。结果免疫结束后2周,小鼠脾淋巴细胞产生IFN-γ水平:混合Ag85 A DNA免疫组[(703.66±394.74) pg/ml]和50μg Ag85A DNA组[(648.60±439.41) pg/ml]明显高于生理盐水组[(70.58±108.76) pg/ml](t值分别为3.975、3.629,P值分别为0.0004、0.0010)和100μg Ag85A DNA组[(86.08±135.73) pg/ml](t值分别为3.878、3.532,P值分别为0.0005、0.0013),但混合Ag85A DNA免疫组和50μg A

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