目的：观察幽门螺杆菌感染人胃上皮细胞后自噬的发生及变化情况，并探索上调幽门螺杆菌感染后人胃上皮细胞GES-1自噬反应对细胞是否具有一定的保护作用，为进一步研究幽门螺杆菌感染与细胞自噬奠定基础。方法使用一定浓度的幽门螺杆菌感染人胃上皮细胞GES-1，通过Western blot检测感染不同时间点GES-1中微管相关蛋白轻链3Ⅰ／Ⅱ（ LC3Ⅰ／Ⅱ）的转换与Beclin 1的表达，免疫荧光染色观察自噬体的出现。确定Xestospongin B处理人胃上皮细胞GES-1的浓度后，将培养细胞分为三组：幽门螺杆菌感染组、幽门螺杆菌感染＋Xestospongin B组、正常培养组。首先确定诱导剂对感染后自噬的上调作用，然后使用微毛细管式细胞分析仪检测细胞凋亡和活性，比较三组细胞存活以及凋亡的差异。结果在GES-1细胞被感染后2 h即可观察到自噬的发生，且呈时间依赖性，于8 h到达高峰，24 h开始恢复基础水平。加诱导后细胞自噬水平上调。单纯感染组细胞活性先迅速降低，2 h之后细胞活性平稳降低，凋亡率逐渐增加。加诱导剂组细胞活性在感染后的6 h内细胞活性稍有降低，6 h后细胞活性开始增加，凋亡率降低。结论幽门螺杆菌能够诱导人胃上皮GES-1发生自噬，Xestospongin B能够上调幽门螺杆菌感染后人胃上皮细胞GES-1的自噬水平，并且上
作者：熊励晶；童煜；谢晓丽；毛萌
来源：中华消化病与影像杂志（电子版） 2015 年 3期
