目的 探讨慢病毒表达载体介导的小鼠CXC型趋化因子受体4(CXCR4)基因体外对小鼠骨髓间充质干细胞(MSC)生物学特性的影响.方法 克隆小鼠CXCR4基因,构建携带CXCR4基因与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)双顺反子结构的重组慢病毒表达载体LV-CXCR4-IRES-EGFP,同时构建对照载体LV-IRES-EGFP.脂质体法包装病毒,并测定滴度.通过优化慢病毒感染MSC条件,建立高表达CXCR4的MSC,荧光显微镜观察EGFP表达,流式细胞术检测细胞表面CXCR4表达,CCK-8法检测MSC对单向混合淋巴细胞培养体系中淋巴细胞增殖的影响,划痕实验和Transwell实验检测MSC体外迁移能力.结果 成功克隆小鼠CXCR4基因,并构建重组慢病毒载体LV-CXCR4-IRES-EGFP和对照载体LV-IRES-EGFP.制备共表达CXCR4和报告基因EGFP的高滴度慢病毒颗粒.优化感染条件后,LV-CXCR4-IRES-EGFP感染组MSC表面CXCR4的表达明显高于LV-IRES-EGFP对照组(P＜0.05),分别为(90.3±3.37)％和(1.53±0.34)％.过表达CXCR4基因不影响MSC对T淋巴细胞增殖的抑制作用(P＞0.05).划痕实验和Transwell实验结果表明,过表达CXCR4可明显提高MSC对划痕损伤修复能力和向高浓度基质细胞衍生因子-1(SDF-1)的迁移能力,并且具有剂量依赖性.结论 成功构建重组慢病毒载体LV-CXCR4-IRES-EGFP,慢病毒载体系统可高效介导

作者：陈伟；李淼；闫志凌；程海；潘彬；曾令宇；李振宇；徐开林

来源：中华血液学杂志 2013 年 34卷 5期