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目的 观察半乳糖凝集素-1(Galectin-1)特异性抑制剂OTX008对氧诱导视网膜病变小鼠视网膜新生血管(RNV)的抑制作用,并探讨其作用机制.方法 7日龄C57BL/6J小鼠128只采用随机数字表法随机分为正常组、单纯模型组、OTX008干预组和磷酸盐缓冲液(PBS)空白对照组,每组32只.正常组小鼠在正常氧环境下饲养;其余3组小鼠建立氧诱导视网膜病变模型.小鼠12日龄时,OTX008干预组小鼠双眼按0.25μg/μl的剂量玻璃体腔注射OTX008 1 μl,PBS空白对照组注射等体积PBS.正常组及单纯模型组小鼠不做其他任何干预和处理.小鼠17日龄时,各组作视网膜冰冻切片并行免疫荧光染色,定性观察Galectin-1蛋白的分布情况;作视网膜组织石蜡切片并行苏木精-伊红染色,计数突破内界膜的血管内皮细胞核;作全视网膜铺片并行免疫荧光染色,观察视网膜血管变化并统计RNV区、无灌注区、缺氧区面积;采用蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测Galectin-1、神经纤毛蛋白质-1(Neuropilin-1)、磷酸化血管内皮生长因子受体2(pVEGFR2)的蛋白相对表达量.结果 与正常组比较,单纯模型组、PBS空白对照组小鼠视网膜Galectin-1蛋白荧光在视网膜神经节细胞层、内丛状层及内核层明显增强;OTX008干预组小鼠视网膜Galectin-1蛋白荧光较单纯模型组、PBS空白对照组明显减弱.单

作者:杨宁;张雯茜;贺涛;邢怡桥

来源:中华眼底病杂志 2017 年 33卷 2期

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作者:
杨宁;张雯茜;贺涛;邢怡桥
来源:
中华眼底病杂志 2017 年 33卷 2期
标签:
视网膜新生血管化/预防和控制 半乳糖凝集素1/拮抗剂和抑制剂 动物实验 Retinal neovascularization/prevention &control Galectin 1/antagonists &inhibitors Animal experimentation
目的 观察半乳糖凝集素-1(Galectin-1)特异性抑制剂OTX008对氧诱导视网膜病变小鼠视网膜新生血管(RNV)的抑制作用,并探讨其作用机制.方法 7日龄C57BL/6J小鼠128只采用随机数字表法随机分为正常组、单纯模型组、OTX008干预组和磷酸盐缓冲液(PBS)空白对照组,每组32只.正常组小鼠在正常氧环境下饲养;其余3组小鼠建立氧诱导视网膜病变模型.小鼠12日龄时,OTX008干预组小鼠双眼按0.25μg/μl的剂量玻璃体腔注射OTX008 1 μl,PBS空白对照组注射等体积PBS.正常组及单纯模型组小鼠不做其他任何干预和处理.小鼠17日龄时,各组作视网膜冰冻切片并行免疫荧光染色,定性观察Galectin-1蛋白的分布情况;作视网膜组织石蜡切片并行苏木精-伊红染色,计数突破内界膜的血管内皮细胞核;作全视网膜铺片并行免疫荧光染色,观察视网膜血管变化并统计RNV区、无灌注区、缺氧区面积;采用蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测Galectin-1、神经纤毛蛋白质-1(Neuropilin-1)、磷酸化血管内皮生长因子受体2(pVEGFR2)的蛋白相对表达量.结果 与正常组比较,单纯模型组、PBS空白对照组小鼠视网膜Galectin-1蛋白荧光在视网膜神经节细胞层、内丛状层及内核层明显增强;OTX008干预组小鼠视网膜Galectin-1蛋白荧光较单纯模型组、PBS空白对照组明显减弱.单

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