目的:观察高糖状态下Nodal对猴视网膜血管内皮细胞(RF/6A细胞)生物学行为的影响。方法:将RF/6A细胞分为正常组、甘露醇组、高糖组、高糖联合非特异小干扰RNA处理组(HG+NC组)、高糖联合小干扰Nodal处理组(HG+siNodal组)。蛋白质免疫印迹法、实时荧光定量聚合酶链反应观察细胞内Nodal蛋白、mRNA相对表达量;噻唑蓝比色法检测Nodal对RF/6A细胞增殖的影响;细胞划痕实验检测Nodal对RF/6A细胞迁移能力的影响;Matrigel体外三维成型法检测Nodal对RF/6A细胞管腔形成的影响;蛋白质免疫印迹法检测RF/6A细胞内磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(pERK1/2)蛋白相对表达量。多组间比较采用单因素方差分析。结果:与HG+NC组比较,HG+siNodal组细胞内Nodal蛋白(
F=33.469)、mRNA相对表达量(
F=38.191)显著下降,细胞增殖能力(
F=28.548)、细胞迁移能力(
F=24.182)显著降低,细胞管腔形成数量显著减少(
F=52.643),差异均有统计学意义(
P<0.05)。与HG+NC组比较,HG+siNodal组细胞内pERK1/2蛋白相对表达量显著降低,差异有统计学意义(
F=44.462,
P<0.01)。
结论:沉默Nodal表达可抑制高糖诱导的RF/6A细胞增殖、迁移及成管能力;其可能通过抑制pERK
作者:曹靖靖;寇振宇;王晴;庄彤彤;东莉洁;王林妮
来源:中华眼底病杂志 2024 年 40卷 2期