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目的 探讨造血干细胞(HSCs)倍增对糖尿病小鼠视网膜微血管内皮细胞的影响.方法 应用小鼠干细胞生长因子(SCF)200μg·kg-1·d-1联合重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-csf)50μg·kg-1·d-1,连续5 d对糖尿病小鼠和非糖尿病小鼠分别进行自体HSCs动员,以生理盐水皮下注射作为对照.应用流式细胞仪以CD34-/low和Sca1+作为标记鉴定外周血HSCs.应用免疫组化方法以CD31和5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记新生的视网膜血管内皮细胞,PAS染色标记成熟的视网膜血管内皮细胞.半定量RT-PCR检测血管内皮生长因子(VEGF)、可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)及血管生成素2(ang-2)在视网膜的表达情况.结果 自体干细胞动员可以使正常小鼠和糖尿病小鼠外周血中产生CD34-/low和Sca1+的细胞数目倍增.在免疫组化切片上可观察到糖尿病小鼠CD31标记的新生血管数目增多,内皮细胞更生速度加快.在BrdU与CD31的免疫组化双重染色中,可观察到新生毛细血管内皮细胞两种抗原双重表达的现象.自体干细胞动员可使小鼠视网膜VEGFR-2含量显著增高,明显下调糖尿病小鼠VEGF和ang-2的表达量.结论 自体HSCs动员可以通过外周血干细胞倍增,环境诱导分化为血管内皮细胞,双向调节VEGF和ang-2等血管渗漏性相关因子,实现治疗性血管重建.

作者:田蓓;黎晓新;沈丽;赵敏;闫征;董建强;于文贞

来源:中华眼科杂志 2006 年 42卷 9期

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作者:
田蓓;黎晓新;沈丽;赵敏;闫征;董建强;于文贞
来源:
中华眼科杂志 2006 年 42卷 9期
标签:
造血干细胞 糖尿病视网膜病变 内皮,血管 造血干细胞动员
目的 探讨造血干细胞(HSCs)倍增对糖尿病小鼠视网膜微血管内皮细胞的影响.方法 应用小鼠干细胞生长因子(SCF)200μg·kg-1·d-1联合重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-csf)50μg·kg-1·d-1,连续5 d对糖尿病小鼠和非糖尿病小鼠分别进行自体HSCs动员,以生理盐水皮下注射作为对照.应用流式细胞仪以CD34-/low和Sca1+作为标记鉴定外周血HSCs.应用免疫组化方法以CD31和5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记新生的视网膜血管内皮细胞,PAS染色标记成熟的视网膜血管内皮细胞.半定量RT-PCR检测血管内皮生长因子(VEGF)、可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)及血管生成素2(ang-2)在视网膜的表达情况.结果 自体干细胞动员可以使正常小鼠和糖尿病小鼠外周血中产生CD34-/low和Sca1+的细胞数目倍增.在免疫组化切片上可观察到糖尿病小鼠CD31标记的新生血管数目增多,内皮细胞更生速度加快.在BrdU与CD31的免疫组化双重染色中,可观察到新生毛细血管内皮细胞两种抗原双重表达的现象.自体干细胞动员可使小鼠视网膜VEGFR-2含量显著增高,明显下调糖尿病小鼠VEGF和ang-2的表达量.结论 自体HSCs动员可以通过外周血干细胞倍增,环境诱导分化为血管内皮细胞,双向调节VEGF和ang-2等血管渗漏性相关因子,实现治疗性血管重建.

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