目的 探讨蓝光光照对体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞凋亡及对线粒体膜通透性转运功能的影响.方法 用蓝光光照体外培养的人RPE细胞.实验分为三部分.第一部分:不同光照度,分为3组,第1组光照度(500±100)lx,第2组光照度(2000±500)lx,第3组光照度(3000±500)lx;光照RPE细胞时间6 h,光照结束后24 h终止培养.第二部分:同一光照度、不同光照时间,检测RPE细胞亚型时分为3组,第1组光照时间6 h,第2组光照时间12 h,第3组光照时间24 h,光照度均为(2000±500)lx;检测线粒体膜电位时也分为3组,第1组光照时间3 h,第2组光照时间6 h,第3组光照时间12 h,光照度均为(2000±500)lx.第三部分:同一光照度和光照时间,光照度(2000±500)lx,光照RPE细胞时间6 h;不同细胞培养终止时间分为4组,第1组终止细胞培养时间为光照后6 h,第2组为光照后12 h,第3组为光照后24 h,第4组为光照后36 h.利用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的原位缺口末端标记(TUNEL)染色、荧光素标记的Annexin V-FITC和PI双染流式细胞检测、透射电镜等手段观察RPE细胞凋亡情况.罗丹明123荧光染料孵育人RPE细胞,流式细胞仪检测线粒体膜电位,酶联免疫法测定细胞色素C活性,比色测定法测定Caspase-3的活性.结果 第二部分第1组TUNEL染色阳性细胞的体积缩小变圆,胞核浓
作者:蔡善君;严密;毛咏秋;周焰;刘关键
来源:中华眼科杂志 2006 年 42卷 12期