目的 研究αA晶状体蛋白特定氨基酸位点磷酸化对人晶状体上皮细胞(HLEC)抗氧化及抗凋亡能力的影响.方法 实验研究.利用基因定点突变技术,将αA晶状体蛋白第45位、66位、122位丝氨酸分别突变为天冬氨酸以模拟磷酸化,导入pEGFP-C1质粒并经脂质体转染HLEC作为实验组(即S45D组、S66D组、S122D组),转染空质粒以及过表达野生型(WT)αA晶状体蛋白的HLEC分别为空白对照组和WT组.经H2O2诱导后,分别应用超氧化物阴离子荧光探针和Annexin V-PE/7AAD双染法检测各组细胞的活性氧水平及凋亡率.两组间参数的比较采用两样本均数比较的t检验或Wilcoxon秩和检验,多组间比较采用随机区组设计的方差分析或Kruskal-Wallis检验.结果 转染模拟磷酸化αA晶状体蛋白的3组细胞超氧化物阴离子平均荧光亮度分别为167.53±18.21,143.54±4.78和143.40±30.19,较空白组(274.42±3.71)显著下降(t=9.963,P=0.001;t=34.961,P＜0.01;Z=1.993,P=0.046),与WT组(192.67± 1.47)亦存在差异(Z=1.964,P=0.049;t=17.887,P＜0.01;Z=1.964,P=0.049);H2O2诱导的细胞凋亡后,模拟αA晶状体蛋白磷酸化的细胞组早期凋亡率分别为15.08％±0.90％,16.59％±5.37％和15.36％±2.62％,较空白组(41.28％±2.70％;t=21.632,P＜0.01;t=8.855,P＜0.01;t=15.450,P＜

作者：叶鸿飞；周鹏；竺向佳；蔡蕾；张可可；樊琪；卢奕

来源：中华眼科杂志 2015 年 51卷 4期