目的为HCV/HBV重叠或混合感染的防治寻求新的高效联合基因免疫策略.方法分别将与HCV核心区基因互补的cDNA 和HBV核心区基因克隆于真核表达载体(pRSC),构建pRSC-HBV/HCV ,转染小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0),通过免疫荧光和Western印迹法检测蛋白的表达,免疫Balb/c小鼠, 用酶联免疫法、乳酸脱氢酶释放法及荷瘤试验观察小鼠体液免疫应答及细胞免疫应答.结果 pRSC-HBV/HCV转染的SP2/0细胞可见HBcAg及HCV核蛋白染色阳性荧光细胞,相对分子质量14 000及21 000处均可见蛋白条带, Western印迹分析可见特异性的蛋白条带. 10只免疫鼠中全部出现抗-HCV及抗-HBV抗体,而对照组(n=10)全阴性.免疫组小鼠脾细胞对转染pRSC-HBV/HCV的SP2/0细胞的细胞毒活性明显高于对照组, 荷瘤试验显示免疫组小鼠注射转染pRSC-HBV/HCV的SP2/0细胞后肿瘤生长缓慢.结论 pRSC -HBV/HCV在Balb/c小鼠可同时诱导对HBcAg及HCV核蛋白的体液免疫应答及细胞免疫应答.
作者:邓涛;范公忍;陈天宝;陈乃玲;胡大荣;王孟薇;贾克明
来源:中华医学杂志 2002 年 82卷 2期