目的研究人CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)对DNA疫苗质粒骨架免疫刺激活性的影响.方法将多拷贝对人和小鼠均有免疫刺激活性的CpG2006序列导入质粒骨架,并在小鼠模型体内外评价重组质粒DNA的免疫刺激活性.结果首先构建了质粒pMini,仅含有卡那抗性基因和pUC18复制起点.然后向pMini中导入了多拷贝对小鼠具有交叉免疫刺激活性的人CpG2006,得到2个重组质粒pCpG11和pCpG26,分别含有9和16拷贝CpG2006.随着插入CpG2006拷贝数的增加,质粒DNA在体外活化小鼠脾细胞分泌IgM的能力逐渐增强,但诱生IFN-γ的能力却依次降低.用重组质粒DNA作为HBsAg疫苗佐剂,免疫BALB/c小鼠,pMini 和pCpG11对特异性总抗体以及IgG1亚型抗体水平无明显影响(P>0.05),但pCpG26能够使两类抗体水平分别提高3倍(P<0.001)和2倍(P<0.02).所有质粒DNA均能够使IgG2a亚型抗体水平提高5～10倍,但三者之间差异无显著意义(P>0.05).结论向质粒骨架中导入一定数量的人CpG-ODN能够增强质粒DNA的免疫刺激活性.
作者：许洪林；邓瑶；王世峰；郭斐；陆柔剑；阮力
来源：中华医学杂志 2002 年 82卷 7期
