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目的 构建含幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A(CagA)基因片段的绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-CagA.方法 从幽门螺杆菌细胞株中扩增出CagA基因片段,经回收、纯化,连接到质粒pGEM-T上,测序、酶切后与质粒pEGFP-C3连接,脂质体法将pEGFP-C3-CagA转染入胃癌细胞株BGC823,用荧光显微镜观察转染的细胞.结果 通过测序、酶切证明CagA插入质粒正确,构建出载体pEGFP-C3-CagA,转染后经荧光显微镜观察到胃癌细胞株BGC823中有绿色荧光.结论 成功构建表达CagA的真核绿色荧光载体.

作者:冯百岁;姚雪华;赵国强

来源:中华医学杂志 2007 年 87卷 8期

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作者:
冯百岁;姚雪华;赵国强
来源:
中华医学杂志 2007 年 87卷 8期
标签:
螺杆菌,幽门 载体蛋白质类 克隆,分子 细胞毒素相关基因A
目的 构建含幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A(CagA)基因片段的绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-CagA.方法 从幽门螺杆菌细胞株中扩增出CagA基因片段,经回收、纯化,连接到质粒pGEM-T上,测序、酶切后与质粒pEGFP-C3连接,脂质体法将pEGFP-C3-CagA转染入胃癌细胞株BGC823,用荧光显微镜观察转染的细胞.结果 通过测序、酶切证明CagA插入质粒正确,构建出载体pEGFP-C3-CagA,转染后经荧光显微镜观察到胃癌细胞株BGC823中有绿色荧光.结论 成功构建表达CagA的真核绿色荧光载体.

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