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目的 体外研究重型再生障碍性贫血(SAA)患者骨髓CD8+ HLA-DR+T细胞的调控因素,进一步探讨该群细胞在SAA免疫发病中的地位.方法 选取2011年7月至2012年3月收治的13例初治SAA患者.免疫磁珠分选SAA患者骨髓CD8+ HLA-DR+T细胞后分为3组:白细胞介素2(IL-2)组(加入IL-2终浓度分别为0、0.1、1、10、100、1000 U/L);环孢素A(CsA)组(在IL-2浓度基础上每孔加入终浓度为400ng/ml的CsA);IL-2受体拮抗剂组(在IL-2浓度基础上每孔加入终浓度为8 μg/ml IL-2受体拮抗剂),孵育72 h后四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖情况.Ficoil法分离SAA患者的骨髓单个核细胞后分为3组:CsA组(加入终浓度为400 ng/ml的CsA)、IL-2组(加入终浓度为100 U/ml的IL-2)和对照组(不加任何刺激物),孵育18 h后加入佛波酯等活化4h,流式细胞仪检测CD8+ HLA-DR+T细胞胞内肿瘤坏死因子β(TNF-β)蛋白的表达水平.结果 IL-2浓度为10、100、1000 U/L时IL-2组CD8+ HLA-DR+T细胞增殖[吸光度(A)值]分别为0.36 ±0.12、0.41±0.12、0.46±0.14,明显高于未加IL-2的空白对照(0.23±0.11),亦高于同等IL-2浓度下的CsA组(0.18±0.05、0.19±0.00、0.20±0.04)和IL-2受体拮抗剂组(0.18±0.05、0.17±0.04、0.18±0.03,均P<0.05);而CsA组和IL-2受体拮抗剂组间差异

作者:刘晓;付蓉;王化泉;刘春燕;阮二宝;瞿文;梁勇;王国锦;王晓明;刘鸿;吴玉红;宋嘉;邢莉民;关晶;李丽娟;邵宗鸿

来源:中华医学杂志 2012 年 92卷 24期

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刘晓;付蓉;王化泉;刘春燕;阮二宝;瞿文;梁勇;王国锦;王晓明;刘鸿;吴玉红;宋嘉;邢莉民;关晶;李丽娟;邵宗鸿
来源:
中华医学杂志 2012 年 92卷 24期
标签:
贫血,再生障碍性 细胞增殖 肿瘤坏死因子类 CD8+HLA-DR+T细胞 Anemia,aplastic Cell proliferation Tumor necrosis factors CD8 +HLA-DR+ T cells
目的 体外研究重型再生障碍性贫血(SAA)患者骨髓CD8+ HLA-DR+T细胞的调控因素,进一步探讨该群细胞在SAA免疫发病中的地位.方法 选取2011年7月至2012年3月收治的13例初治SAA患者.免疫磁珠分选SAA患者骨髓CD8+ HLA-DR+T细胞后分为3组:白细胞介素2(IL-2)组(加入IL-2终浓度分别为0、0.1、1、10、100、1000 U/L);环孢素A(CsA)组(在IL-2浓度基础上每孔加入终浓度为400ng/ml的CsA);IL-2受体拮抗剂组(在IL-2浓度基础上每孔加入终浓度为8 μg/ml IL-2受体拮抗剂),孵育72 h后四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖情况.Ficoil法分离SAA患者的骨髓单个核细胞后分为3组:CsA组(加入终浓度为400 ng/ml的CsA)、IL-2组(加入终浓度为100 U/ml的IL-2)和对照组(不加任何刺激物),孵育18 h后加入佛波酯等活化4h,流式细胞仪检测CD8+ HLA-DR+T细胞胞内肿瘤坏死因子β(TNF-β)蛋白的表达水平.结果 IL-2浓度为10、100、1000 U/L时IL-2组CD8+ HLA-DR+T细胞增殖[吸光度(A)值]分别为0.36 ±0.12、0.41±0.12、0.46±0.14,明显高于未加IL-2的空白对照(0.23±0.11),亦高于同等IL-2浓度下的CsA组(0.18±0.05、0.19±0.00、0.20±0.04)和IL-2受体拮抗剂组(0.18±0.05、0.17±0.04、0.18±0.03,均P<0.05);而CsA组和IL-2受体拮抗剂组间差异

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