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目的 探讨腺苷三磷酸(ATP)对冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(BK通道)的激活作用及其机制.方法 采用酶消化法急性分离正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞;膜片钳实验技术记录全细胞状态下BK通道电流;钙离子成像技术记录ATP对细胞内钙离子浓度影响.结果 膜片钳实验结果显示,加入1 mmol/L ATP前后,BK通道电流密度分别为(137±13) pA/pF和(179±15)pA/pF(P <0.05);钙离子成像结果显示,加入0.5 mmol/L ATP前后,细胞内钙离子浓度荧光信号强度比值分别为2.46±0.08和4.04±0.21 (P<0.05).分别采用嘌呤(P2Y1)受体阻滞剂MRS2179、磷脂酶C(PLC)受体阻滞剂U73122和三磷酸肌醇(IP3)受体阻滞剂2-APB孵育冠状动脉平滑肌细胞,再测定加入0.5 mmol/L ATP后3组细胞内钙离子浓度荧光信号强度比值,分别是2.70±0.06、2.65±0.12和2.69±0.13,与未加入3种阻滞剂相比,钙离子浓度荧光信号强度比值均明显降低(P<0.05).结论 ATP可以通过P2Y1-PLC-IP3通路升高细胞内钙离子浓度,从而激活BK通道.

作者:王湘芸;吴莹;钱玲玲;党时鹏;季圆;徐凤;王萌;汤徐;姚勇

来源:中华医学杂志 2015 年 95卷 13期

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作者:
王湘芸;吴莹;钱玲玲;党时鹏;季圆;徐凤;王萌;汤徐;姚勇
来源:
中华医学杂志 2015 年 95卷 13期
标签:
腺苷三磷酸 大电导钙激活钾通道 钙离子 冠状动脉 平滑肌细胞 Adenosine triphosphate Large conductance calcium activated potassium channel Calcium Coronary artery Smooth muscle cell
目的 探讨腺苷三磷酸(ATP)对冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(BK通道)的激活作用及其机制.方法 采用酶消化法急性分离正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞;膜片钳实验技术记录全细胞状态下BK通道电流;钙离子成像技术记录ATP对细胞内钙离子浓度影响.结果 膜片钳实验结果显示,加入1 mmol/L ATP前后,BK通道电流密度分别为(137±13) pA/pF和(179±15)pA/pF(P <0.05);钙离子成像结果显示,加入0.5 mmol/L ATP前后,细胞内钙离子浓度荧光信号强度比值分别为2.46±0.08和4.04±0.21 (P<0.05).分别采用嘌呤(P2Y1)受体阻滞剂MRS2179、磷脂酶C(PLC)受体阻滞剂U73122和三磷酸肌醇(IP3)受体阻滞剂2-APB孵育冠状动脉平滑肌细胞,再测定加入0.5 mmol/L ATP后3组细胞内钙离子浓度荧光信号强度比值,分别是2.70±0.06、2.65±0.12和2.69±0.13,与未加入3种阻滞剂相比,钙离子浓度荧光信号强度比值均明显降低(P<0.05).结论 ATP可以通过P2Y1-PLC-IP3通路升高细胞内钙离子浓度,从而激活BK通道.

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